藏藥甘青烏頭中二萜生物堿的研究.pdf

1、甘青烏頭是藏醫(yī)常用藥，藏藥名榜嘎，植物來源系毛茛科烏頭屬植物甘青烏頭Aconitum tanguticum（Maxim.）Stapf的干燥全草（“榜嘎”的另一基源為毛茛科烏頭屬植物船盔烏頭Aconitum naviculare（Bruhl.）Stapf的干燥全草）。始載于《月王藥診》，其性涼、味苦、有小毒，具清熱解毒功效，多入藏成方制劑用于傳染病發(fā)熱，流行性感冒，肝、膽熱病，肺熱，腸熱和食物中毒等疾病的治療。甘青烏頭的化學(xué)成分包括生物堿

2、（以二萜生物堿為主）、黃酮苷、酚酸和揮發(fā)油等，具有抗病毒、抗菌、抗炎鎮(zhèn)痛、抗腫瘤和抗心律失常等藥理活性。
　　本文采用硅膠柱色譜、Sephadex LH-20凝膠柱色譜、反相ODS柱色譜、制備液相色譜、制備硅膠薄層色譜和重結(jié)晶等分離純化手段對甘青烏頭總生物堿部位的化學(xué)成分進行了系統(tǒng)研究，從中共分離得到了43個化合物。根據(jù)理化性質(zhì)、光譜分析（UV、MS、1H-NMR、13C-NMR、HSQC、HMBC和1H，1H-COSY等），X射

3、線單晶衍射及與文獻值對比的方法，鑒定了其中30個化合物的結(jié)構(gòu)，其中新化合物4個，首次從甘青烏頭中分離得到的化合物24個，其中21個生物堿（二萜生物堿9個）：分別為2β,9β,11β,13β-tetrahydrohetisine，hetisane-2α,11α,13α,19β-tetrol-2-benzoate-11-sulfonate，13-dehydro-2β,3α,6β-trihydroxyhetisine，芥子酰胺-4-O-β-D

4、-葡萄糖苷，11α,13α-dihydroxyhetisinone，異葉烏頭堿，tanaconitine，鹽酸阿替新，苯甲酰胺，海替生，氧化大麥堿，candicinechloride，二氫阿替生，異光黃素，對羥基苯乙胺，3-(4-aminophenyl)propenoic acid，腺苷，3-(p-hydroxyphenyl)propionic acid amide，N-甲基酪胺，環(huán)異亮氨酸-亮氨酸二肽，苯丙氨酸；5個酚酸：分別為對羥基

5、苯乙醇，對羥基桂皮酸，尼泊金丁酯，紅景天苷，trans-ferulic acid-4-O-β-D-allopyranoside；4個其他類型化合物：分別為β-谷甾醇，鄰苯二甲酸正丁基異丁基酯，苯甲酸，(2R，3R)-2,3,4-三羥基丁酸。采用CPE法對已經(jīng)分離鑒定的7個二萜生物堿成分（分別為11α,13α-dihydroxyhetisinone，異葉烏頭堿，tanaconitine，鹽酸阿替新，海替生，2β,9β,11α,13β-te

6、trahydrohetisine，13-dehydro-2β,3α,6β-trihydroxyhetisine）進行了抗H1N1流感病毒活性篩選，結(jié)果表明化合物11α,13α-dihydroxyhetisinone具有良好的抗H1N1流感病毒活性。說明二萜生物堿可能為甘青烏頭藥材清熱解毒的化學(xué)成分。
　　為了有效監(jiān)管市場上的榜嘎藥材，本文建立了相應(yīng)的質(zhì)量標準。2015版《中國藥典》規(guī)定榜嘎的基源為甘青烏頭Aconitum tang

7、uticum（Maxim.） Stapf或船盔烏頭Aconitum naviculare（Bruhl.）Stapf的干燥全草。參照2015年版《中國藥典》四部通則相關(guān)方法，對榜嘎的水分、總灰分及醇溶性浸出物進行了測定；以鹽酸阿替新為檢測指標，采用紫外分光光度法建立了榜嘎中總生物堿的含量測定方法。以槲皮素和山柰酚為檢測指標，采用高效液相色譜法建立了榜嘎藥材中總黃酮醇苷的含量測定方法。測定結(jié)果顯示，17批榜嘎藥材水分含量介于7.23％~10

8、.2%之間，平均值8.31%；總灰分含量介于5.94%~18.6%之間，平均值10.7%；醇溶性浸出物含量介于11.3%~29.4%之間，平均值為21.4%；生物堿含量介于0.386%~1.99%之間，平均值0.896%；總黃酮醇苷含量介于0.420%~3.09%之間，平均值為1.63%。依據(jù)2015年版《中國藥典》限量標準制定原則，本文暫定榜嘎藥材中水分含量不得過12.0%，總灰分不得過15.0%，醇溶性浸出物質(zhì)量分數(shù)不得低于17.0