HPLC同時檢測多種非甾體抗炎藥殘留的研究.pdf

1、非甾體抗炎藥(non-steroidalanti-inflammatorydrugs，NASIDs)具有抗炎解熱，緩解疼痛，治療風濕性疾病的療效。近年來，由于養(yǎng)殖業(yè)趨于集約化和大規(guī)模化發(fā)展，非甾體抗炎藥已經(jīng)廣泛應用于養(yǎng)殖業(yè)中。這類藥使用泛濫，使養(yǎng)殖周邊的水體以及水體中的生物都受到了一定程度的污染。非甾體抗炎藥會導致腸胃、肝腎，血液和神經(jīng)系統(tǒng)副反應，全世界每天大約有3千萬人使用這類藥緩解病痛，其中有0.2％～0.4％的患者致死。因此，許多

2、國家和地區(qū)規(guī)定了非甾體類藥物的最大殘留量。目前國內(nèi)針對非甾體抗炎藥的檢測主要是參照中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標準(SN/T2190-2008)以及歐盟標準(2002/657/EC)，但還沒有制定相應的國標，為了保障我國的動物源性食品出口貿(mào)易，保障消費者的身體健康，確保動物源性食品中非甾體抗炎藥殘留量在安全食用范圍內(nèi)，從而建立一種簡單、快速、可靠、靈敏的檢測方法是控制殘留量的基礎(chǔ)。
　　 目前對非甾體抗炎藥殘留檢測的方法有氣

3、相色譜法、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法、高效液相色譜法、高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法、毛細管電泳法等。
　　 本文針對非甾體抗炎藥的性質(zhì)，選取四種非甾體抗炎藥進行研究，分別是：氟尼辛葡甲胺、美洛昔康、酮洛芬和雙氯芬酸鈉。采用酸化后的乙醇結(jié)合超聲波微波輔助提取，并優(yōu)化了凈化條件，高效液相色譜法(HPLC)上樣檢測，建立了同時檢測動物源性食品以及水生生物鯽魚中4種非甾體抗炎藥的殘留檢測方法，研究成果如下：
　　 1.獲得提取4種非甾體抗炎藥

4、的最佳條件。以羊肉為實驗材料，比較了酸化后的乙腈、甲醇和乙醇有機溶劑對4種非甾體抗炎藥提取效果，結(jié)果表明酸化后的乙醇和乙腈的提取回收率較高，考慮到乙腈的毒性較大，對環(huán)境有害，所以本實驗選取酸化乙醇作為提取劑，在此基礎(chǔ)上，還研究了超聲波、微波以及漩渦震蕩對提取效果的影響，結(jié)果表明超聲波和微波聯(lián)用輔助提取的效果好。
　　 2.獲得了凈化提取樣品的最佳條件。羊肉組織和鯽魚組織的成分比較復雜，在超聲波和微波的作用后釋放出大量的極性(如氨

5、基酸類)和非極性(如脂類)雜質(zhì)，通過液-液萃取和固相萃取的方法使樣品得到較好的凈化。本實驗采用的正己烷萃取了提取液中的非極性成分，研究了C18、硅藻土、氧化鋁和硅膠為填料的固相萃取柱對4種非甾體抗炎藥的凈化效果。結(jié)果表明以硅藻土為填料的固相萃取柱對目標物保留效果較好。
　　 3.優(yōu)化了色譜條件。色譜柱為HypersilODSC18柱，有報道采用乙腈-0.1％甲酸(0.5mmol/L乙酸銨)為流動相，實驗顯示，峰型較寬和拖尾現(xiàn)象，

6、本實驗對羊肉組織樣品分析時進行了優(yōu)化，選擇乙腈-0.2％三乙胺水溶液(40:60，v/v，用磷酸調(diào)節(jié)pH到3.5)：流速為0.8ml/min，紫外檢測波長為255nm；礎(chǔ)在對鯽魚組織樣品分析時流動相稍有調(diào)整為乙腈-0.1％三乙胺水溶液(60:40，v/v，用磷酸調(diào)節(jié)pH到3.5)，使樣品分析時間縮短了10min。
　　 4.建立了4種非甾體抗炎藥的同時檢測方法。采用高效液相色譜法(二級管陣列檢測器)，同時檢測出羊肉中氟尼辛葡甲胺