調(diào)衡方對荷瘤小鼠腫瘤微環(huán)境中Foxp3+Treg細胞的影響.pdf

1、目的:通過動物實驗，研究不同劑量調(diào)衡方對Foxp+Treg細胞的影響，用免疫組化法檢測Lewis肺癌荷瘤鼠和H22肝癌荷瘤鼠腫瘤局部微環(huán)境中Foxp3、TGF-β、IL-10三項指標，闡釋中醫(yī)扶正祛邪療法的優(yōu)勢所在，完善調(diào)衡方治療腫瘤的理論基礎，為臨床選藥拓展思路。
　　方法:本實驗采用Lewis肺癌模型和H22肝癌模型進行研究。Lewis肺癌模型建立及處理：將培養(yǎng)好的Lewis肺癌細胞制成懸液，細胞計數(shù)為1.3×106/ml，接

2、種在C57BL/6小鼠左前腋下，將接種后的小鼠按隨機分組原則分為5組，10只/組。于接種后第二天開始灌胃，給藥10天后，摘取瘤塊組織固定于10％中性福爾馬林中，用免疫組化法檢測瘤組織中Foxp3、TGF-β、IL-10表達，結(jié)果采用計算機圖像分析系統(tǒng)進行分析Foxp3、TGF-β、IL-10陽性率。H22肝癌模型建立及處理：將培養(yǎng)好的H22肝癌細胞制成懸液，細胞計數(shù)為1.3×106/ml，接種在昆明種小鼠左前腋下，將接種后的小鼠按隨機分

3、組原則分為5組，10只/組。接種后第二天開始灌胃，給藥10天后，摘取瘤塊組織固定于10%中性福爾馬林中，免疫組化方法檢測瘤組織中Foxp3、TGF-β、IL-10表達，結(jié)果采用計算機圖像分析系統(tǒng)進行分析Foxp3、TGF-β、IL-10陽性率。
　　結(jié)果:調(diào)衡方對Lewis肺癌荷瘤小鼠實驗表明：調(diào)衡方大、中劑量、貞芪對照組與荷瘤模型組比較Foxp3、TGF-β、IL-10的表達量存在顯著差異（P<0.01），調(diào)衡方小劑量與荷瘤模型

4、組比較Foxp3、TGF-β、IL-10表達量存在差異，具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；調(diào)衡方對H22荷瘤鼠實驗表明：調(diào)衡方大、中劑量、貞芪對照組與荷瘤模型組比較Foxp3、TGF-β、IL-10的表達量存在顯著差異（P<0.01），調(diào)衡方小劑量與荷瘤模型組比較Foxp3、TGF-β、IL-10表達量存在差異，具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；以上結(jié)果提示調(diào)衡方能夠降低Lewis肺癌、H22肝癌荷瘤小鼠瘤組織中Foxp3、TGF-β、IL

5、-10的表達水平。
　　結(jié)論:前期實驗證明，對于不同瘤株，調(diào)衡方均具有抑制腫瘤生長及轉(zhuǎn)移作用。本次實驗選取Lewis肺癌和H22肝癌荷瘤模型，從Foxp3+Treg角度出發(fā)，探討其對腫瘤微環(huán)境中免疫抑制狀態(tài)的調(diào)控作用；提示調(diào)衡方對荷瘤機體的影響，可能與其降低腫瘤微環(huán)境中Foxp3、TGF-β、IL-10的表達量相關(guān)，并以此為基礎改善荷瘤體腫瘤局部微環(huán)境的免疫抑制狀態(tài)，調(diào)整機體的免疫功能，從而發(fā)揮抗瘤抑瘤的作用。并且這種治療效果能夠