卵裂球丟失對凍融胚胎移植結(jié)局的影響及子代臍血淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組分析.pdf

1、凍融胚胎移植（Frozen-thawed embryo transfer, FET）已成為輔助生殖技術(shù)(Assisted reproductive technology, ART)的一個重要組成部分。伴隨而來的卵裂球丟失問題也日益受到關(guān)注，之前的研究對卵裂球丟失是否會對胚胎的發(fā)育產(chǎn)生影響存在著爭議。關(guān)于子代圍生期結(jié)局，先前的研究多見于凍融胚胎和新鮮胚胎移植的比較，而針對卵裂球丟失的研究甚少。近年來新興的轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)RNA-Seq可有助

2、于我們獲得大量關(guān)于FET出生子代的遺傳信息，從而揭示相關(guān)分子機理。本研究通過大樣本的臨床資料分析和轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究，旨在評價卵裂球丟失對凍融胚胎移植結(jié)局及子代圍生期結(jié)局的影響，為FET的臨床合理應(yīng)用提供依據(jù)。
　　第一部分卵裂球丟失對凍融胚胎移植結(jié)局影響及子代圍生期結(jié)局比較
　　目的:研究凍融胚胎過程中卵裂球的丟失是否會對胚胎的種植和發(fā)育以及子代圍生期結(jié)局產(chǎn)生影響。
　　方法:回顧性分析了2005年1月至2012年12月在

3、四大生殖中心進行的5573例FET周期，所有移植的胚胎均丟失至少一個卵裂球的周期納入丟失組(N=1860)，所有移植的胚胎卵裂球均完整的周期納入完整組(N=3713)，比較分析了兩組間的種植率、妊娠率和活產(chǎn)率等相關(guān)移植結(jié)局。同時對其中所有的丟失組單胎子代(N=269)、完整組單胎子代(N=687)和其他自然妊娠的單胎子代(N=1762)的圍生期結(jié)局進行了比較和分析。
　　結(jié)果:在凍融胚胎移植結(jié)局的比較上，丟失組在種植率、化學(xué)妊娠率

4、、臨床妊娠率和活產(chǎn)率等方面均顯著低于完整組，但兩組的異位妊娠率和流產(chǎn)率無顯著性差異。關(guān)于單胎活產(chǎn)子代的圍生期結(jié)局，早產(chǎn)率、剖宮產(chǎn)率和大于胎齡兒(Largefor gestational age，LGA)的發(fā)生率在丟失組和完整組均顯著高于自然妊娠組，而小于胎齡兒(Small for gestational age，SGA)的發(fā)生率則在丟失組中明顯高于完整組和自然妊娠組。
　　結(jié)論:胚胎凍融過程中卵裂球的丟失會降低胚胎的發(fā)育潛能，且會

5、增加小于胎齡兒發(fā)生的風(fēng)險。同時凍融胚胎會導(dǎo)致大于胎齡兒發(fā)生的風(fēng)險增加，其機理尚待進一步研究。
　　第二部分卵裂球丟失和完整的凍融胚胎與自然妊娠子代的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究
　　目的:采用RNA-Seq的方法進一步研究凍融胚胎及卵裂球丟失對子代臍血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組的改變，從轉(zhuǎn)錄組水平分析差異表達基因?qū)ψ哟斐傻挠绊憽?br>　　方法:研究對象為在本院行FET后于2012年6月至2013年5月分娩的單胎子代，其中由卵裂球丟失胚胎發(fā)育而來的納

6、入丟失組，由卵裂球完整胚胎發(fā)育而來的納入完整組，同時隨機選取符合條件的自然妊娠單胎子代納入自然妊娠組。收集臍帶血并提取淋巴細(xì)胞后，對每組各5例進行了轉(zhuǎn)錄組測序，并對有顯著表達差異的基因（Differentially expressed gene，DEG）進行了功能分析。
　　結(jié)果:從臍帶血淋巴細(xì)胞中我們一共檢測到9427個轉(zhuǎn)錄本，丟失組和自然妊娠組之間有92個DEGs，完整組和自然妊娠組之間只有2個DEGs，這些基因大部分與細(xì)胞的