肺靶向治療藥物載體Fe-,3-O-,4-磁微粒的安全性研究.pdf

1、目的：探討Fe3O4磁微粒對(duì)肺泡上皮細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和凋亡的影響以及靜脈注射Fe3O4磁微粒對(duì)小鼠肝、腎功能影響及對(duì)心、肺、肝、腎、脾組織的影響。 方法：實(shí)驗(yàn)分體外實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)兩大部分。 體外實(shí)驗(yàn)：體外培養(yǎng)人血管內(nèi)皮細(xì)胞株和肺泡上皮細(xì)胞，取指數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)用Fe3O4磁微粒經(jīng)低溫間歇滅菌法處理后用RPMI1640培養(yǎng)基浸提得100％浸提液，實(shí)驗(yàn)時(shí)以RPMI1640培養(yǎng)基稀釋至所需濃度。加入浸提液使其終

2、濃度分別為20％,、40％、60％、80％、100％，陰性對(duì)照為RPMI1640培養(yǎng)液。分別培養(yǎng)24、36、48小時(shí)。用MTT法、流式細(xì)胞儀等觀察細(xì)胞增殖指數(shù)和凋亡。 體內(nèi)試驗(yàn)：取雄性昆明小鼠50只，隨機(jī)分為五組，各組小鼠經(jīng)尾靜脈一次性分別注入0.5ml生理鹽水和25％、50％、75％、100％Fe3O4磁微粒，于1、7、14、21天采集眼眶后靜脈叢血，檢測(cè)肝腎功能指標(biāo)(AST、ALT、TP、ALB、BUN、CR)。滿30天處死

3、，取出肺、肝、腎、心、脾組織，做病理切片，觀察其組織變化；電鏡觀察其超微結(jié)構(gòu)變化。 結(jié)果：(1)MTT結(jié)果顯示：與對(duì)照組相比，隨著Fe3O4磁微粒浸提液干預(yù)濃度和干預(yù)時(shí)間的逐漸增加，肺泡上皮細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖率無(wú)明顯變化，各組內(nèi)和各組間比較不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 (2)流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)凋亡結(jié)果顯示：與對(duì)照組相比，隨著Fe3O4磁微粒浸提液干預(yù)濃度的增高，肺泡上皮細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡率無(wú)增高的

4、趨勢(shì)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 (3)肝腎功能結(jié)果：隨著Fe3O4磁微粒浸提液干預(yù)濃度的增高和時(shí)間的延長(zhǎng)，對(duì)照組與各試驗(yàn)組肝腎功能指標(biāo)無(wú)明顯差別；各組內(nèi)和各組間的比較，均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 (4)組織病理學(xué)結(jié)果：尾靜脈一次性注入0.5ml100％Fe3O4磁微粒30天后，肺泡上皮細(xì)胞、肝細(xì)胞中可見(jiàn)單個(gè)或成團(tuán)暗黃色顆粒，為吞噬入胞漿的Fe3O4磁微粒。肺、肝、心、腎、脾組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)均正常。 (