大鼠DRG神經(jīng)元NK-1受體激活對(duì)TTX不敏感型鈉通道和TRPV1受體的調(diào)制.pdf

1、P物質(zhì)(SubstanceP,SP)是速激肽家族的成員,它在神經(jīng)系統(tǒng)中有廣泛表達(dá)。在外周神經(jīng)系統(tǒng)中,P物質(zhì)主要表達(dá)在傷害性感覺(jué)神經(jīng)元上,參與外周傷害性刺激信息向脊髓背角的傳遞。大量的研究表明,P物質(zhì)的受體neurokinin-1(NK-1)在脊髓背角淺層有大量的表達(dá),它在慢性痛的形成以及外周損傷引起的中樞敏化中發(fā)揮重要作用。
　　 最近,越來(lái)越多的證據(jù)表明,NK-1受體除了在脊髓背角表達(dá)外,在背根節(jié)(DRG)神經(jīng)元上也有表達(dá)。胞

2、內(nèi)記錄和膜片鉗的實(shí)驗(yàn)表明,SP可以引起DRG神經(jīng)元和三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元去極化,提示DRG胞體上功能性NK-1受體的存在。免疫組織化學(xué)的證據(jù)也表明NK-1受體在支配光滑皮膚的無(wú)髓鞘纖維的軸突上有表達(dá)。我們先前的工作通過(guò)免疫組織化學(xué)和western-blot的方法直接證明了NK-1在DRG胞體上的表達(dá)。盡管如此,外周表達(dá)的NK-1受體到底有什么功能意義,還需要進(jìn)一步的研究。
　　 在DRG神經(jīng)元上表達(dá)有多種鈉通道,其中Nav1.8和N

3、av1.9是兩種TTX不敏感型的鈉通道。它們主要表達(dá)在DRG中介導(dǎo)傷害性信息的神經(jīng)元上,在傷害性信息的處理和傳遞中發(fā)揮重要作用。TRPV1受體是特異性表達(dá)于傷害性感覺(jué)神經(jīng)元的另一個(gè)信號(hào)分子。它是一種非選擇性陽(yáng)離子通道,可以被熱,酸和辣椒素等多種刺激激活,是傷害性熱刺激特異的換能器,在熱痛覺(jué)信息傳遞以及病理狀態(tài)引起的熱痛敏中發(fā)揮重要作用。
　　 本論文應(yīng)用全細(xì)胞膜片鉗,單細(xì)胞鈣成像以及動(dòng)物行為學(xué)測(cè)定等多種技術(shù),研究了DRG神經(jīng)元表

4、達(dá)的NK-1受體對(duì)TTX不敏感鈉通道和TRPV1受體的調(diào)制,及可其能的作用機(jī)制。結(jié)果如下：
　　 1.Nav1.8
　　 在74.5％(114/153)的背根神經(jīng)節(jié)小細(xì)胞上能夠記錄到Nav1.8介導(dǎo)的高閾值激活的鈉電流。給予1μM的NK-1受體激動(dòng)劑[Sar9,Met(O2)11]-substanceP(Sar-SP)后,有43.3％(13/30)神經(jīng)元的Nav1.8電流顯著增強(qiáng)。這種增強(qiáng)作用可以被NK-1受體特異的拮抗

5、劑Win51708以及PKC抑制劑BIM所阻斷,但不能被PKA抑制劑H-89所阻斷。同時(shí),PKC亞型PKCε的抑制劑εV1-2也可以完全阻斷Sar-SP的增強(qiáng)作用。在給予Sar-SP后,神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢婚撝碉@著降低,而刺激誘發(fā)的動(dòng)作電位發(fā)放頻率則顯著升高。
　　 2.Nav1.9
　　 在66.1％(76/115)的DRG小細(xì)胞上可以記錄到Nav1.9電流。給予1μM的Sar-SP后,有36.0％(9/25)神經(jīng)元的Nav

6、1.9電流顯著增強(qiáng)。這種增強(qiáng)作用可以被NK-1受體特異的拮抗劑Win51708以及PKC抑制劑BIM所阻斷,但不能被PKA抑制劑H-89所阻斷,提示Sar-SP對(duì)Nav1.9的調(diào)制是由PKC信號(hào)通路介導(dǎo)的。
　　 3.TRPV1
　　 在87個(gè)DRG小細(xì)胞上,有63個(gè)(72.3％)神經(jīng)元可以記錄到辣椒素誘導(dǎo)的TRPV1電流。給予1μM的Sar-SP后,有47.8％(11/23)神經(jīng)元的Nav1.9電流顯著增強(qiáng)。Sar-S