傷科熏洗湯劑的提取工藝及質量分析研究.pdf

1、目的：結合臨床應用情況，對傷科熏洗湯的提取工藝、質量分析及小鼠離體透皮率進行研究，為其臨床合理應用提供藥學相關方面的資料。
　　 方法：
　　 1.傷科熏洗湯劑的提取工藝研究：以水為溶媒，采用水蒸氣蒸餾法連接揮發(fā)油測定裝置，回流提取，選擇L9(34)的正交實驗優(yōu)選傷科熏洗湯劑的水提取工藝條件。試驗中，以處方藥材中揮發(fā)油提取率和防風藥材中有效成分升麻素苷(C22H27O11)和5-O-甲基維斯阿米醇苷(C22H28O10)

2、的提取總量為考察指標，以浸泡時間、提取時間、提取次數和加水量為考察因素。采用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，收集水提取液。采用高效液相色譜法測定水提液中升麻素苷(C22H27O11)和5-O-甲基維斯阿米醇苷(C22H28O10)的總含量。
　　 2.傷科熏洗湯劑的質量分析研究：采用薄層鑒別法對提取的傷科熏洗湯劑中的防風、川芎、獨活、羌活、白芷、桂枝、花椒、艾葉、伸筋草等藥材分別進行鑒別。采用高效液相色譜法測定傷科熏洗湯劑中防風的有效成

3、分升麻素苷(C22H27O11)和5-O-甲基維斯阿米醇苷(C22H28O10)的總量。HPLC法色譜條件為：色譜柱：Agilent Zorbar SB-C18(4.6×250mm，5μm)；流動相：甲醇-乙腈-水(12:10:78)；檢測波長：254nm；流速：1ml·min-1；柱溫：30℃。
　　 3.小鼠離體透皮試驗：采用改良Franz裝置對傷科熏洗湯進行小鼠皮膚離體透皮試驗，采用HPLC法測定接收液中升麻素苷(C22H

4、27O11)和5-O-甲基維斯阿米醇苷(C22H28O10)的總含量，計算傷科熏洗湯劑中升麻素苷(C22H27O11)和5-O-甲基維斯阿米醇苷(C22H28O10)的小鼠離體透皮量。采用薄層色譜法檢查接收液中防風、獨活的小鼠離體透皮情況。
　　 結果：
　　 1.優(yōu)選的水提取工藝條件為：藥材加10倍量水，不浸泡，提取3次，每次20min。由三批驗證結果計算，傷科熏洗湯中揮發(fā)油的平均轉移率為44.4％，升麻素苷和5-O-

5、甲基維斯阿米醇苷的平均轉移率為29.6％。三批驗證結果為：處方藥材三次提取液中揮發(fā)油提取率分別為0.137％(ml/g)、0.107％(ml/g)、0.146％(ml/g)；處方藥材三次提取液中升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷總量分別為1.707‰、1.556‰、1.657‰。
　　 2.質量分析研究：傷科熏洗湯劑中防風、川芎、獨活、羌活、白芷、桂枝、花椒、艾葉、伸筋草9味藥材的薄層色譜鑒別方法簡單，圖譜清晰，供試品溶液在與藥

6、材對照溶液相同斑點處有相應斑點出現，陰性空白對照無干擾。升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷含量測定結果：升麻素苷含量測定的回歸方程為：Y=3014.2x-25.673，r=0.9999(n=6)，線性范圍為：0.035～0.350μg；5-O-甲基維斯阿米醇苷含量測定的回歸方程：Y=1864.7x-23.579，r=0.9998(n=6)，線性范圍為：0.037～0.370μg；精密度試驗：升麻素苷RSD為1.89％(n=6)，5-O-

7、甲基維斯阿米醇苷RSD為1.12％(n=6)；穩(wěn)定性試驗：升麻素苷RSD為1.94％(24h)，5-O-甲基維斯阿米醇苷RSD為1.10％(24h)；重復性試驗：升麻素苷的平均含量為0.584‰，RSD=1.30％(n=6)，5-O-甲基維斯阿米醇苷的平均含量為0.967‰，RSD=0.96％(n=6)；回收率試驗：升麻素苷的平均加樣回收率為101.4％，RSD=2.47％(n=6)，5-O-甲基維斯阿米醇苷的平均加樣回收率為98.8％

8、，RSD=2.20％(n=6)。三批提取液中升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷含量分別為為3.19μg/ml、3.12μg/ml、3.16μg/ml。
　　 3.小鼠離體透皮試驗：用脫毛劑將小鼠皮膚脫毛，70％乙醇溶液為接收液，測定傷科熏洗湯中升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷在5h內的累積離體小鼠透皮吸收率分別為2.27μg/cm2和2.52μg/cm2；用薄層色譜法鑒別出防風、獨活成分在5h內能夠透過小鼠皮膚進入到接收液中。