二仙湯對(duì)卵巢切除大鼠胰島素敏感性的影響及其機(jī)制的研究.pdf

1、目的:
　　更年期后女性生理、心理等方面的變化，使體內(nèi)脂肪分布發(fā)生異常，其中以積聚在腰腹部為主，這種以腰腹部為中心的肥胖，被稱為更年期女性“向心性肥胖”。更年期女性向心性肥胖已嚴(yán)重危害到更年期女性的身體健康。已有研究表明:它是導(dǎo)致更年期女性2型糖尿病發(fā)生的重要原因之一。中醫(yī)認(rèn)為更年期后女性向心性肥胖的主要病機(jī)是以腎陰陽兩虛為主，濕阻為輔。故此選用了具有溫補(bǔ)腎陽、滋補(bǔ)腎陰，兼能祛濕的二仙湯。西醫(yī)認(rèn)為，導(dǎo)致更年期女性向心肥胖發(fā)生的主要

2、因素是雌激素分泌減少。因此西醫(yī)選擇了雌激素替代療法來防治更年期女性肥胖，但是長期使用可能會(huì)增加更年期后女性患乳腺癌等疾病的機(jī)率。關(guān)于中醫(yī)選擇的二仙湯方是否能防治更年期女性向心性肥胖及預(yù)防更年期女性向心性肥胖引起的2型糖尿病呢？本實(shí)驗(yàn)基于以上問題來探討二仙湯對(duì)卵巢切除大鼠胰島素敏感性的影響及其機(jī)制。
　　方法:
　　1.整體水平觀察二仙湯對(duì)卵巢切除大鼠胰島素敏感性的影響。
　　40只雌性SD大鼠，卵巢切除術(shù)后第7天，隨機(jī)

3、分組，每組8只，共分五組，分別是假手術(shù)組(SHAM)、模型組(OVX)、二仙湯低劑量組(EXDL，30mg/kg)、二仙湯高劑量組(EXDH，60mg/kg)、雌激素組(E2，0.01mg/kg)。假手術(shù)組和模型組給予等量生理鹽水，每天灌胃一次。連續(xù)治療14周后，CT檢測各組大鼠腹腔內(nèi)脂肪及皮下脂肪的相對(duì)含量，檢測空腹血糖、血清胰島素水平、糖耐量，并計(jì)算各組大鼠的胰島素抵抗指數(shù);應(yīng)用qPCR技術(shù)，檢測各組大鼠腹腔內(nèi)脂肪中的MCP-1、A

4、diponectin的mRNA相對(duì)水平。
　　2.細(xì)胞水平探討二仙湯影響卵巢切除大鼠胰島素敏感性的可能機(jī)制。
　　制備二仙湯含藥血清，取15只雌性SD大鼠，隨機(jī)分為3組，每組5只，分別是對(duì)照組（等量生理鹽水）、二仙湯低劑量組(30mg/kg)、二仙湯高劑量組(60mg/kg)。每天灌胃一次。連續(xù)2周后，斷頭取血，室溫靜置2h，1300rpm，4℃，離心10min。給予已分化成熟的3T3-L1脂肪細(xì)胞缺氧0h、4h、12h、2

5、4h。應(yīng)用ELISA法檢測細(xì)胞上清液中MCP-1的水平，確定缺氧時(shí)間點(diǎn)。隨機(jī)分三組:缺氧對(duì)照血清干預(yù)組(HCSI)、缺氧二仙湯低劑量含藥血清干預(yù)組(HEXDLSI)、缺氧二仙湯高劑量含藥血清干預(yù)組(HEXDHSI)。缺氧前二仙湯含藥血清預(yù)先作用2h，缺氧12h后。應(yīng)用ELISA法檢測各組細(xì)胞上清液中MCP-1的含量。
　　結(jié)果:
　　整體水平實(shí)驗(yàn)結(jié)果:二仙湯可降低卵巢切除大鼠腹腔內(nèi)脂肪含量，降低胰島素抵抗指數(shù)并提高糖耐量，q

6、PCR檢測顯示二仙湯可下調(diào)卵巢切除大鼠腹腔內(nèi)脂肪中MCP-1的mRNA水平、上調(diào)Adiponectin的mRNA水平。
　　細(xì)胞水平實(shí)驗(yàn)結(jié)果:3T3-L1前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化成熟后，體外缺氧0h、4h、12h、24h并ELISA檢測各時(shí)間段細(xì)胞上清液中MCP-1的濃度結(jié)果顯示:缺氧的最佳時(shí)間點(diǎn)是:12h。ELISA檢測二仙湯含藥血清預(yù)干預(yù)2h，缺氧處理12h后，各組細(xì)胞上清液中的MCP-1水平結(jié)果顯示:低、高劑量二仙湯含藥血清預(yù)干預(yù)