全反式維甲酸對高糖誘導(dǎo)人腎小管上皮細(xì)胞ACE-ACE2表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察全反式維甲酸（ATRA）對高糖誘導(dǎo)人腎小管上皮細(xì)胞（HK-2）血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（ACE）、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2（ACE2）及血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)表達(dá)的影響，探討RAS在糖尿病腎?。―N）發(fā)病機制中作用及ATRA對其的影響。
　　 方法：體外培養(yǎng)的HK-2細(xì)胞隨機分為正常對照組（NG組）；高糖組（HG組）；滲透壓對照組（MG組）各組分別培養(yǎng)24h、48h和72h。在HG組加入不同濃度的ATRA(ATRA1組10-7mo

2、l/L、ATRA2組10-6mol/L、ATRA3組10-5mol/L)，藥物溶劑對照組（無水乙醇組，HG+10-2mol/L無水乙醇），Captopril 藥效對照組（Captopril組，HG+10-5mol/Lcaptopril）各組分別培養(yǎng)48h。收集細(xì)胞及細(xì)胞上清液，采用RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄多聚酶聯(lián)反應(yīng)）檢測ACE、ACE2mRNA的表達(dá)，Western印跡檢測ACE、ACE2蛋白的表達(dá)，ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）檢測培養(yǎng)細(xì)

3、胞上清液AngⅡ的表達(dá)。
　　 結(jié)果：（1）HG組HK-2細(xì)胞ACEmRNA及蛋白表達(dá)在培養(yǎng)24h 即升高，在48h和72h 升高更明顯，與各時間點NG組比較，差別有統(tǒng)計學(xué)意義（P均<0.01）。HG組HK-2細(xì)胞ACE2mRNA及蛋白表達(dá)在高塘培養(yǎng)48h和72h后明顯下降,與相應(yīng)時間點NG組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P均<0.01）。在HG組AngⅡ水平較NG組顯著升高,差別有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05)。（2）高糖狀態(tài)下加入不同

4、濃度ATRA 培養(yǎng)48h后觀察，10-7mol/L ATRA 即開始抑制高糖誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞ACEmRNA和蛋白的表達(dá)（P<0.05），并且隨著劑量的增加抑制作用增強，結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）；10-7mol/LATRA既可逆轉(zhuǎn)高糖誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞ACE2mRNA和蛋白的表達(dá)的下降（P<0.05），并且隨著劑量的增加逆轉(zhuǎn)作用增強，結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）；加入ATRA后10-7mol/LATRA組AngⅡ濃度較HG組