β3腎上腺素能受體對慢性心力衰竭大鼠心肌細(xì)胞L型鈣通道的影響.pdf

1、背景：
　　 慢性心力衰竭（chronic heart failure，CHF，簡稱慢性心衰）是各種心血管疾病的終末階段，是心血管疾病患者主要的死亡病因。多種代償機(jī)制可能參與CHF的發(fā)生和發(fā)展，其中心衰時交感－腎上腺髓質(zhì)系統(tǒng)的激活是CHF的一個重要生物學(xué)特征。目前，β受體阻滯劑已成為CHF 治療的基石。
　　 βAR （βadrenergic receptor，βAR）屬于G蛋白偶聯(lián)受體（G-protein couple

2、dreceptors）的超家族，主要分為β1AR、β2AR、β3AR、β4AR。β3AR是較晚發(fā)現(xiàn)的存在心血管系統(tǒng)一種受體亞型，與心衰關(guān)系密切。與β1AR、β2AR的細(xì)胞內(nèi)信號通路及功能不同，在動物及人衰竭的心肌組織或心肌細(xì)胞可發(fā)現(xiàn)選擇性β3AR激動劑產(chǎn)生劑量依賴的負(fù)性肌力作用，可明顯加重心衰，增加死亡率，加重衰竭心肌細(xì)胞凋亡，β3AR的電生理效應(yīng)目前研究尚少，且存在爭議。因此，本研究主要通過建立慢性心衰大鼠模型來探討β3AR在衰竭的心

3、室中表達(dá)及激動后對單個心肌細(xì)胞L 型鈣通道電流（L-type calcium channel current, Ica-L）影響。
　　 目的：
　　 1．建立CHF大鼠模型，探討β3AR 特異性激動劑BRL37344對心室肌β3ARmRNA表達(dá)的影響。
　　 2.建立心肌β3AR上調(diào)的CHF大鼠模型，在此基礎(chǔ)上探討β3AR 激動對衰竭心室肌細(xì)胞Ica-L的影響。
　　 方法：
　　 1.將36只

4、Wistar大鼠分為空白假手術(shù)組（sham-operated group，Sham組，n=10）和模型組(Model set group，Ms group，n=26）。采用主動脈縮窄法建立CHF模型。3個月后模型組存活24只大鼠分CHF組和BRL組。BRL組予以尾靜脈注射BRL37344，0.4nmol/Kg· min 尾靜脈注射10min，每周2次，連續(xù)4周。另Sham組和CHF組同時尾靜脈注射等量的生理鹽水。
　　 2.監(jiān)測

5、觀察指標(biāo)：
　　 2.1血流動力學(xué)：心率（heart rate，HR）、左室收縮末壓（left ventricular endsystolic pressure，LVESP）、左室舒張末壓（left ventricular end diastolicpressure，LVEDP）、左室內(nèi)壓最大上升和下降速率（the maximAlrate of rise and fallof left ventricular pressure，

6、±dp/dt）。
　　 2.2 左室質(zhì)量指數(shù)。
　　 2.3RT-PCR 監(jiān)測左心室肌?3ARmRNA表達(dá)。
　　 2.4.酶解法制備單個大鼠左心室肌細(xì)胞，采用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)檢測左心室肌細(xì)胞（Ica-L）。
　　 結(jié)果：
　　 （1）與Sham組比較,CHF組大鼠LVESP、dp/dtmax 顯著降低(P<0.01)，LVEDP 顯著升高(P<0.01)。與CHF組比較，BRL組LVESP、dp

7、/dtmax 顯著降低(P<0.01)，LVEDP 顯著升高(P<0.01)。BRL組大鼠的LVMI 顯著低于Sham組和HF組(P<0.01)，MS組大鼠LVMI 顯著高于Sham組，BRL組顯著高于CHF組。
　　 （2）MS組大鼠心室肌細(xì)胞?3AR表達(dá)心衰組明顯高于Sham組(P<0.01)，BRL組明顯高于CHF組(P<0.01)。
　　 （3）與Sham組比較，MS組Ica-L 電流峰值明顯下降（P<0.01)

8、,BRL組Ica-L電流峰值明顯高于CHF組(P<0.05)。于各組左心室肌細(xì)胞外液加入BRL37344，Sham組的Ica-L 峰值升高(P<0.05)，HF組和BRL組Ica-L 峰值明顯增加(P<0.01)，且同等濃度下BRL組Ica-L 峰值增加的更顯著(P<0.01)。
　　 （4）于各組細(xì)胞外液中加入?3AR 特異性阻斷劑L-748,337，待穩(wěn)定5分鐘后再加入BRL37344. Ica-L 峰值變化不明顯。