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1、生物小分子的分析檢測(cè)對(duì)疾病的預(yù)測(cè)和醫(yī)學(xué)的診斷都具有重要的意義,發(fā)展并完善生物小分子的檢測(cè)方法,使其更加快速、靈敏、準(zhǔn)確和方便,是目前研究的熱點(diǎn)之一。核酸適體由于具有易于合成和化學(xué)修飾、特異性好以及親和力強(qiáng)等特點(diǎn),且設(shè)計(jì)靈活,適用于多種信號(hào)轉(zhuǎn)換方法,為生物小分子的分析檢測(cè)提供了一種新的手段。本論文以生物小分子腺苷為檢測(cè)對(duì)象,利用核酸適體能高特異性以及高親和性識(shí)別小分子的特點(diǎn),結(jié)合單壁碳納米管和納米金顆粒等多種納米材料,通過(guò)不同的信號(hào)轉(zhuǎn)換手
2、段發(fā)展了基于“裂開(kāi)型”核酸適體的檢測(cè)方法,實(shí)現(xiàn)對(duì)生物小分子的簡(jiǎn)便、快速及靈敏的檢測(cè)。具體如下:
(1)基于“裂開(kāi)型”核酸適體和單壁碳納米管的生物小分子檢測(cè)研究。
基于單壁碳納米管-DNA復(fù)合物在高鹽條件下的穩(wěn)定性變化情況,利用單壁碳納米管的類過(guò)氧化物酶活性,發(fā)展了一種生物小分子的檢測(cè)方法。該方法無(wú)需標(biāo)記,只需通過(guò)目測(cè)比色即可實(shí)現(xiàn)檢測(cè),檢測(cè)下限為44nM,靈敏度較高,特異性好,拓展了單壁碳納米管-核酸適體體系的
3、應(yīng)用范圍,并有望實(shí)現(xiàn)對(duì)其他小分子的檢測(cè)。
(2)基于“裂開(kāi)型”核酸適體和納米金顆粒光散射信號(hào)的生物小分子檢測(cè)研究。
基于“裂開(kāi)型”核酸適體修飾的納米金顆粒與腺苷特異性結(jié)合所引起的尺寸變化,利用納米金顆粒的光散射信號(hào),發(fā)展了一種生物小分子的檢測(cè)方法。該方法僅需一步混合即可實(shí)現(xiàn)檢測(cè),簡(jiǎn)便、快速,檢測(cè)下限為7nM,靈敏度高,特異性好,有望發(fā)展簡(jiǎn)便、快速及靈敏的識(shí)別生物分子的方法。
(3)基于“裂開(kāi)型”
4、核酸適體和納米金顆粒增強(qiáng)信號(hào)的表面等離子體共振傳感器對(duì)生物小分子的檢測(cè)。
基于“裂開(kāi)型”核酸適體修飾的納米金顆粒與腺苷特異性結(jié)合后將納米金顆粒捕獲到傳感芯片表面,利用納米金顆粒與金膜的電子耦合效應(yīng)增強(qiáng)表面等離子體共振(SPR)信號(hào),構(gòu)建了直接檢測(cè)生物小分子的高靈敏的SPR傳感器件。該傳感器靈敏度高,檢測(cè)下限可達(dá)到1.5pM,特異性好,芯片可再生,并且操作簡(jiǎn)便,拓展了表面等離子體共振傳感技術(shù)的應(yīng)用,并有望實(shí)現(xiàn)其他小分子的高靈
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