版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、南昌大學(xué)碩士學(xué)位論文IKKαβshRNA真核表達(dá)載體的構(gòu)建及穩(wěn)定低表達(dá)IKKβHUEVCs系的建立姓名:劉麗麗申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):藥理學(xué)指導(dǎo)教師:黃起壬201106ABSTRACTABSTRACTObjectiveThisstudyistoconstructashorthairpinRNA(shRNA)eukaryoticexpressionvectortargetingtheIKKa/[3genesbyRNAinterferenc
2、e(RNAi)andtoestablishstableHumanUmbilicalVeinEndothelialCellsline(HUVECs)expressingird(pgeneMethods:TllenucleofidesequencesofIKKa/pgeneswereretrievedfromGenbankAccordingtotheguidelinesforshRNAdesignfourpairsofDNAsequence
3、containingasmallhairpinstructuretargetingtheIICKdDgenesweredesignedandsynthesizedThesynthesizedsequenceswereclonedintopGPU6/GFP/NeoandidentifiedbyrestrictionenzymeanalysisandsequencinganalysisAfterthat,therecombinantvect
4、orsweretransfectedintoHUVECswithlipofectamine2000,andthemosteffectivevectorswerescreenedbyassayingtheIrxa/pproteinlevelsFinallypGPU6/GFP/NeoIKXpshRNA2WastransfectedintoHUVECs,thenG418(600Itg/m1)wasaddedintothemediachange
5、devery35daysWesternblotWasusedtoidentifytheantiG418cellclonesResults:nlerestrictionenzymeanalysisandsequencingshowedthattheeightrecombinantvectorswereconstructedexactlytermed嬲pGPU6/GFP/NeoIKKashRNAl,2,34andpGPU6/GFP/Neoi
6、gaq3一shRNAl,2,3,4WesternblotresultsshowedthattheexpressionlevelsoflKKaandIKKl3proteinswereupregulated,showingsignificantdifferencebetweenHGgroupandControlgroup(P0O1);theeukaryoticexpressionvectorscontainingthepGPU6/GFP/N
7、eoIKKashRNA4andpGPU6/GFP/NeoirdcpshRNA2efficientlydownregulatedtheproteinexpressionlevelsoflKKaandIKKpgenesinducedbyelevatedglucoseconcentrationinHUVECs(P001)AntiG418cellclonestransfected、析tllpGPU6/GFP/Neo—irdcps㈣A2weref
8、ormedviaG418resistanceWesternblotresultsshowedthattheIKKpproteinexpressionofstableHUVECsexpressingimcpgenewassignificantlyinhibitedConclusion:TherecombinantvectorsareconstructedsuccessfullyandCaninhibitexpressionlevelsof
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 穩(wěn)定表達(dá)人MCHR2基因CHO細(xì)胞系的建立及shRNA真核表達(dá)載體的構(gòu)建.pdf
- 人JNK3真核表達(dá)載體的構(gòu)建及穩(wěn)定表達(dá)SHSY5Y細(xì)胞系的建立.pdf
- 攜帶IKK2dn基因重組腺病毒載體的構(gòu)建及表達(dá)驗(yàn)證.pdf
- hTERT真核表達(dá)載體的構(gòu)建與表達(dá).pdf
- PreS-Tat真核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá).pdf
- 人BRCA1真核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá).pdf
- 小鼠SP-B shRNA真核表達(dá)載體的構(gòu)建、鑒定及有效序的篩選.pdf
- TGF-βRII shRNA 真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及鑒定.pdf
- 編碼大鼠RGMa的shRNA真核表達(dá)載體構(gòu)建及其干擾效率的篩選鑒定.pdf
- sfat-1真核表達(dá)載體構(gòu)建及其轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系建立.pdf
- 人α-乳清蛋白基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建及原核表達(dá).pdf
- 趨化因子受體CXCR4 shRNA真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其在真核細(xì)胞中的表達(dá).pdf
- 人Bcl-2基因shRNA真核表達(dá)載體的構(gòu)建、鑒定及有效序的篩選.pdf
- 豬Ghrelin基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其表達(dá).pdf
- 人SLC真核表達(dá)載體的構(gòu)建,表達(dá)及其效應(yīng)研究.pdf
- 人eif4a3真核表達(dá)載體構(gòu)建及穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株篩選
- 人肝再生增強(qiáng)因子基因的克隆、真核表達(dá)載體構(gòu)建及原核表達(dá).pdf
- siRNA真核表達(dá)載體的構(gòu)建及對MSTN基因表達(dá)抑制的研究.pdf
- IBRV gC和gD基因的原核表達(dá)與真核表達(dá)載體的構(gòu)建.pdf
- 人noggin基因克隆及真核表達(dá)載體構(gòu)建.pdf
評論
0/150
提交評論