適冷蛋白酶與中溫蛋白酶溫度適應(yīng)的分子基礎(chǔ)及其在海洋生物蛋白資源高值化加工中的應(yīng)用研究.pdf_第1頁(yè)
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1、第一部分、適冷蛋白酶和中溫蛋白酶溫度適應(yīng)的分子基礎(chǔ)自1999年以來(lái),實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展了對(duì)深海適冷微生物和適冷蛋白酶的研究工作。陳秀蘭等(2001)從1855米深的海底淤泥中分離到產(chǎn)適冷蛋白酶的適冷菌Pseudoalteromonassp.SM9913,分離純化了該菌分泌的具有典型適冷特征的適冷蛋白酶MCP—01,對(duì)并對(duì)其酶學(xué)特性進(jìn)行了系統(tǒng)的研究,研究表明MCP-01為適冷絲氨酸蛋白酶(Chenetal,2002,Chenetal,2003a;

2、Chenetal,2003b)。在此研究基礎(chǔ)上,以屬于同一家族的中溫蛋白酶BP-01為參照,對(duì)MCP—01結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系進(jìn)行了系統(tǒng)的研究,揭示了MCP-01高效適冷催化、穩(wěn)定性差、對(duì)熱敏感的分子結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。首先克隆了BP—01的基因,根據(jù)基因的堿基序列推導(dǎo)出BP-01的氨基酸序列,與潘軍(2005)推導(dǎo)的MCP-01的氨基酸序列進(jìn)行比對(duì),結(jié)果表明MCP-01和BP-01的氨基酸序列同源性較低。通過(guò)同源模建,分別構(gòu)建了MCP-01和BP-

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