寡核苷酸介導(dǎo)的基因定點糾錯及其應(yīng)用于β-地貧基因治療的研究.pdf

1、基因治療是指將遺傳物質(zhì)導(dǎo)入患者體內(nèi),以使患者獲得治療的一種新型治療方式.要獲得理想的臨床治療效果,必須實現(xiàn)靶向性基因治療.根據(jù)基因治療的原理及過程,其靶向性包括以下三個方面:治療基因轉(zhuǎn)移的組織特異性、轉(zhuǎn)移基因整合的特異性及轉(zhuǎn)移基因的適宜表達.目前,一些實驗室通過改造基因治療載體結(jié)構(gòu)等基因工程手段獲得靶向性治療已取得進展.基因原位修復(fù)策略是一種直接的基因療法,它針對基因缺陷部位進行修復(fù),保持了基因原有的染色質(zhì)環(huán)境,因此是一種理想的靶向性基

2、因治療方式.同源重組雖然可以實現(xiàn)缺陷基因的原位替換,而且利用正負篩選的方法可提高ES細胞中同源重組的效率,但同源重組在哺乳動物體細胞中發(fā)生的效率極低(10<'-5>-10<'-6>),正負篩選也不適用于體細胞,對于體細胞的基因治療而言無實際應(yīng)用的價值.最后在應(yīng)用細胞抽提物系統(tǒng)對嵌合體修復(fù)術(shù)的機制研究中發(fā)現(xiàn),嵌合體的兩條鏈在定點糾錯反應(yīng)中發(fā)揮的作用不同,DNA鏈具有引發(fā)糾錯反應(yīng)的功能,而摻有RNA的嵌合鏈不具備糾錯功能.據(jù)此發(fā)現(xiàn)一種帶有硫