版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、對(duì)蝦傳染性皮下及造血組織壞死病毒?。↖nfectious Hypodermal andHaematopoietic Necrosis,IHHN)為對(duì)蝦主要病毒病之一,近些年,IHHN流行范圍遍布全球各地,造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。IHHHV敏感宿主是細(xì)角濱對(duì)蝦和凡納濱對(duì)蝦,對(duì)細(xì)角濱對(duì)蝦引起急性感染和高死亡率,對(duì)凡納濱對(duì)蝦可導(dǎo)致慢性矮小殘缺綜合癥(RDS),對(duì)養(yǎng)殖業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將IHHNV列為須向其申報(bào)的甲殼類重
2、要疾病之一。目前,IHHNV在流行病學(xué)和診斷方面受到重視,但其致病機(jī)理鮮有報(bào)道。本文重點(diǎn)著力于IHHNV衣殼蛋白鰓細(xì)胞膜受體的研究,通過VOPBA、Pull Down、噬菌體隨機(jī)十二肽庫,篩選IHHNV CP受體蛋白,為IHHNV進(jìn)一步研究提供依據(jù)。
本文首先提取IHHNV射陽株發(fā)病凡納濱對(duì)蝦鰓組織的DNA,根據(jù)GenBank公布的射陽株序列(Accession KF214742)設(shè)計(jì)引物構(gòu)建了IHHNV CP原核表達(dá)載體。進(jìn)
3、行蛋白原核表達(dá),目的蛋白主要以包涵體形式表達(dá),用HisTrapTM HP柱純化目的蛋白后,進(jìn)行尿素透析,將透析后的蛋白免疫新西蘭白兔,制備多克隆抗體,三免后抗體效價(jià)達(dá)到1∶102400。
利用勻漿、超速離心分離未感染IHHNV凡納濱對(duì)蝦的鰓細(xì)胞膜蛋白,獲得均勻分布的凡納濱對(duì)蝦鰓細(xì)胞膜蛋白條帶。
利用VOPBA結(jié)合Pull Down實(shí)驗(yàn)篩選IHHNV CP凡納濱對(duì)蝦鰓細(xì)胞膜受體,得到Signal transducer
4、and activator of transcription(STAT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子)、Heatshock protein90(熱休克蛋白90)、Prophenoloxidase-2(酚氧化酶原2型)、Na+/K+-ATPasealpha subunit(Na+/K+-ATP酶a亞基)、NM23 protein五種蛋白。將NM23基因構(gòu)建到pGEX-4t-1原核表達(dá)載體上,進(jìn)行原核表達(dá),用GST磁珠進(jìn)行純化,進(jìn)行NM23與CP的
5、VOPBA和NM23與CP的GST Pull Down驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明,NM23能與IHHNV CP相互作用。
利用噬菌體隨機(jī)十二肽庫淘選IHHNV CP結(jié)合肽,經(jīng)過三次親和→洗脫→擴(kuò)增→親和的循環(huán)淘洗過程,得到6種十二肽可以與IHHNV CP結(jié)合,A(SWSSWVYRDPQT)、B(HSFKWLDSPRLR)、C(SSFKWLDSPRLR)、D(HRSKWVYSDPQR)、E(YWSKWVDWHPQR)、F(SSCKWVD
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- IHHNV病毒蛋白與凡納濱對(duì)蝦圍食膜蛋白的互作研究.pdf
- 凡納濱對(duì)蝦-草魚混養(yǎng)模式的初步研究.pdf
- 凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeus vannamei)血藍(lán)蛋白免疫作用的初步研究.pdf
- 野生和養(yǎng)殖對(duì)蝦IHHNV和WSSV共感染調(diào)查及其對(duì)凡納濱對(duì)蝦的影響研究.pdf
- 凡納濱對(duì)蝦血藍(lán)蛋白相互作用蛋白的研究.pdf
- 凡納濱對(duì)蝦免疫相關(guān)分子LVAKT與LVFLOT的初步研究.pdf
- 凡納濱對(duì)蝦肌肉蛋白組成及其肉糜特性研究.pdf
- 凡納濱對(duì)蝦育種現(xiàn)狀與對(duì)策
- 凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeus vannamei)脂肪營(yíng)養(yǎng)的研究.pdf
- 凡納濱對(duì)蝦降血壓活性成份的研究.pdf
- 凡納濱對(duì)蝦制品生產(chǎn)工藝的研究.pdf
- 凡納濱對(duì)蝦(Penaeus vannamei)對(duì)植物蛋白源的利用研究.pdf
- 凡納濱對(duì)蝦淡化養(yǎng)殖水質(zhì)規(guī)律研究.pdf
- 18529.凡納濱對(duì)蝦血藍(lán)蛋白大亞基變體的研究
- 凡納濱對(duì)蝦飼料中不同大豆蛋白源替代魚粉蛋白的研究.pdf
- 凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeus vannamei)生長(zhǎng)和生物能量學(xué)的初步研究.pdf
- 凡納濱對(duì)蝦-金錢魚-蕹菜綜合養(yǎng)殖模式的初步探討.pdf
- 對(duì)蝦白斑綜合癥病毒(WSSV)囊膜蛋白VP28與對(duì)蝦鰓細(xì)胞膜蛋白的分離和結(jié)合活性分析.pdf
- 凡納濱對(duì)蝦殼中β蝦青蛋白的提取、純化及其性質(zhì)研究.pdf
- 脂多糖、多巴胺對(duì)凡納濱對(duì)蝦血細(xì)胞作用機(jī)制的研究.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論