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文檔簡介
1、分類號:密級:華中農業(yè)大學碩士學位論文核糖體展示Anticalin模擬抗體庫篩選抗氨節(jié)青霉素模擬抗體ConstruetionofAntiealinLibraryandSereeningAntiamPieillinMimieAntibodyby形bosomeDisPlay研究生:李曉芳指導教師:高志賢教授專業(yè)..獲得學位名稱:微生物學理學碩士研究方向:獲得學位時間:食品安全2009年6月華中農業(yè)大學食品科學與技術學院二00九年六月華中農業(yè)
2、大學2009屆碩士學位論文第二章BBP的合成與高效表達,.…,,..…,……,…二..............……,................................……。.121.前言.。,..…,.…,…,,.‘,.……“二,.……,……。.二,.,.…,......……,.‘…、‘..…、二‘.‘.、.…:…、.…‘.…,……,.、二‘..…122、材料與方法...........……,…,....……,......
3、....……,,..…,.…,、....................……,......……,..…,.,..…122,1材料.......……,......……,…,.,…,.......……,,.…。.……,…,……,..……,。.,…。..……,............……122.LI質粒與菌株..…,.........……。..…,...........................……,.....……,......……,.
4、......……122.1.2主要試劑.....……,..……,…,..............................……,............……。二,...…。...……。…122.1,3主要儀器設備.‘.,、二、.…‘.…,……,..…‘.……、,.,...........................……,.……,.…~……132.2方法,...........……,.,..…,......……,........
5、...……卜..、…,…,.............................................……132.2.IBBP序列的優(yōu)化設計與引物合成…,..................................……,........’....……132.2.2BBP基因的PCR合成.…、.…,、.…,.…,.‘二,二、..……。................……,.……。........……142.22,1B
6、BP基因的分段物合成…,.,.…,…,二,.。................……,......................……巧2.2.2.2BBP基因的1一8弓物合成.,..…、.,...……_....……,........……,.....……,、...……162.2.2.3BBP基因全長的合成......……,.…,.‘..........……,二,二‘.…、二,.‘..…。.,二甲..…、.…,162.2.3DH5a感受態(tài)細
7、胞二,..............……,.……,…,,......……,…”二..…、.…,....……‘.....……172.2.4BBP克隆重組載體的構建與鑒定.....……,“.……,.,.............……、,............……172.2.5重組表達質粒pET32a一BBP的構建與誘導表達.…‘..…,‘..…‘…,..........……,182.2.5.1pE下32一BBP表達質粒的構建二,.…”…”.…
8、,.…,..…,二,…,~.‘二”.…,.。...一182.2.5.2pE下犯a一BBP的誘導表達...........……,............................................……182.2.6重組表達質粒PBV220一BBP的構建與誘導表達..……,..……,…,..…,一,二192.2.6.1表達質粒pBV220一BBP的構建二,…,.…,.,.,二,..…,……,…卜.,...........
9、..……192.2.6.2PBV220一BBP的誘導表達...................……,...................................……202.2.7BBP的變復性..........……~........……,...................……、.…,......……,............……202.2.8BBP的純化..…,,…,,.…,二。二、.…。...……,.,二,.,.…,.
10、.…,二,.…,……,.,…‘................……212.2.8.1Ni柱再生:.……,.,…‘......……~.....……~...........................................……,212.2.8.2Ni柱純化..……,.,二,..……,..…,..…、、..…,.,二,~.......……,……,…。,.…,…,二,,.…,…212.2.9BBP的W七sternblot檢測...
11、............................................................……,,..…213.結果與分析.…,.....……,二,二‘、.二一,,、二,.……、...……,......……、...................……‘............……,二223.1合成序列的PCR結果............................................……。.
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