孕期硝酸鑭暴露對仔代大鼠免疫功能的影響.pdf

1、目的：
　　1.研究硝酸鑭是否可以通過胎盤屏障進入仔代大鼠體內，母鼠與仔鼠經(jīng)“血-胎盤屏障”內暴露標志物的相關性。
　　2.開展一代繁殖毒性擴展試驗，探討孕期染毒硝酸鑭對仔代大鼠體液免疫、細胞免疫、非特異性免疫功能的影響，為制定食品中稀土元素的每日允許攝入量（ADI）和稀土的風險評估提供實驗依據(jù)。
　　方法：
　　參考一代繁殖毒性擴展實驗（OECD443）的標準進行發(fā)育免疫毒性實驗，選擇健康成年SD大鼠，按雌雄1

2、:1的比例合籠，每日觀察陰栓確定受孕情況，獲得40只孕鼠，將孕鼠隨機分為對照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組，每組10只，于妊娠第7天至第16天每日灌胃給予硝酸鑭水溶液，劑量分別為0、2、20、60 mg/kg BW，對照組灌胃給予等量蒸餾水，灌胃量為10 ml/kg BW。仔鼠出生后第4天（PND4）進行窩標準化，使每窩仔鼠數(shù)目均為4只，雌雄各半，電感耦合等離子體質譜法（ICP-MS）檢測母鼠、仔鼠全血中鑭元素含量。斷乳后仔鼠分籠喂養(yǎng)

3、，每窩選取雌雄各一只作為A隊列，另每窩選取雌雄各一只作為B隊列。其中A隊列80只仔鼠出生后第52天（PND52）觀察主要臟器臟體比和組織病理學，用流式細胞儀檢測外周血淋巴細胞分型以及血清IL-1α、γ-IFN、IL-10、IL-4、TNF、IL-2含量；B隊列80只仔鼠于出生后第55天（PND55）取脾進行抗體生成細胞測定（即空斑實驗）以及淋巴細胞增殖能力測定。整個試驗期間觀察并記錄孕鼠周體重、周進食量，仔鼠周體重、周進食量。試驗結果采

4、用SPSS19.0軟件進行單因素方差分析，BMDS軟件分析其劑量效應關系。
　　結果：
　　1.孕鼠體重隨妊娠時間的延長逐漸增加，處理組與對照組在孕期不同階段無明顯差異（P＞0.05）。母鼠妊娠期進食量和總食物利用率處理組與對照組比較無顯著性差異（P＞0.05）。
　　仔鼠出生后體重迅速增加，各劑量組之間無統(tǒng)計學差異。斷乳后仔鼠每周進食量處理組與對照組比較無顯著性差異（P＞0.05），但硝酸鑭中、高劑量組的雌性仔代大鼠

5、在出生后第五周的食物利用率低于對照組（P＜0.05）。硝酸鑭各劑量組主要臟器臟體比與對照組比較無顯著差異（P＞0.05）。病理結果顯示部分肝臟細胞脂肪變性、小葉內炎性細胞浸潤，腎臟炎性細胞浸潤，但各組出現(xiàn)的比例無差異，其他臟器無明顯病理改變。
　　2.母鼠全血中鑭元素含量三個劑量組均高于對照組（P<0.05）；仔代雄性大鼠全血鑭元素低、中、高劑量組均高于對照組（P<0.05）；仔代雌性大鼠全血鑭元素中、高劑量組高于對照組（P<0.

6、05）。
　　3.雄性仔鼠高劑量組ConA誘導脾T淋巴細胞增殖能力明顯高于對照組（P<0.05）；空斑形成個數(shù)各劑量組之間無差別（P>0.05）。
　　4.雌性仔鼠全血NK細胞百分比各劑量組均高于對照組（P<0.05），CD4/CD8、T細胞和B淋巴細胞所占百分比與對照組比較無顯著性差異（P>0.05）。
　　5.仔鼠各劑量組血清細胞因子水平與對照組比較無顯著差異（P>0.05）。
　　6.BMDS軟件分析T淋巴

7、細胞增殖能力、NK細胞得出，劑量組之間存在劑量效應關系，基準劑量下限（BMDL）為0.21 mg/kg BW。
　　結論：
　　1.硝酸鑭可以通過胎盤屏障進入仔代大鼠血液中，仔鼠血液中鑭元素與母鼠血中鑭元素水平有劑量效應關系。
　　2.孕期經(jīng)口暴露硝酸鑭可以影響仔代大鼠細胞免疫功能，使T淋巴細胞增殖能力增強，對B淋巴細胞增殖能力未見影響；硝酸鑭對仔代大鼠的體液免疫功能未見影響。
　　3.孕期暴露硝酸鑭可以影響仔代