肝臟細(xì)胞生長(zhǎng)相關(guān)基因在大鼠肝再生中表達(dá)模式和作用分析.pdf

1、肝臟有很強(qiáng)再生能力，部分肝切除(partial hepatectomy，PH)后，殘肝細(xì)胞經(jīng)過(guò)激活、增殖、再分化及組織結(jié)構(gòu)重建等生理生化活動(dòng)、持續(xù)約一周時(shí)間將丟失的肝組織補(bǔ)償，這一過(guò)程稱(chēng)為肝再生(liver regeneration，LR)。各種肝臟細(xì)胞生長(zhǎng)是肝再生中主要的生物學(xué)事件，因此，系統(tǒng)了解參與各種肝臟細(xì)胞生長(zhǎng)的基因在肝再生中的表達(dá)譜及支配的生理生化活動(dòng)對(duì)闡明肝再生分子機(jī)理有重要方面。以往相關(guān)報(bào)道多研究特定肝臟細(xì)胞生長(zhǎng)中單個(gè)或幾

2、個(gè)基因在肝再生中的作用，但關(guān)于各種肝臟細(xì)胞生長(zhǎng)涉及的眾多基因在肝再生中綜合作用，國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)報(bào)道。為此，本文通過(guò)檢索NCBI、KEGG、RGD等網(wǎng)站資料和查閱相關(guān)文獻(xiàn)，找出了參與肝臟干細(xì)胞、肝細(xì)胞、膽管上皮細(xì)胞、枯否氏細(xì)胞、肝內(nèi)皮細(xì)胞、肝星形細(xì)胞、陷窩細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞等九種肝臟細(xì)胞生長(zhǎng)的基因，用含28700個(gè)基因、占大鼠基因組90％基因的RatGenome 230 2.0芯片檢測(cè)了大鼠部分肝切除后恢復(fù)23個(gè)時(shí)點(diǎn)的大鼠再生肝基

3、因表達(dá)譜，確定了鑒定肝再生相關(guān)基因標(biāo)準(zhǔn)，用生物信息學(xué)和系統(tǒng)生物學(xué)等方法分析了這些基因在大鼠肝再生中的表達(dá)模式和互作關(guān)系。同時(shí)，用熒光定量PCR檢驗(yàn)了g6pc、lifr、cd68和npas2等四個(gè)基因在肝再生中的表達(dá)變化，以判斷Rat Genome 230 2.0芯片檢測(cè)結(jié)果的可靠性。 研究結(jié)果表明，隨機(jī)抽取的四個(gè)基因的熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果與Rat Genome 230 2.0芯片檢測(cè)結(jié)果基本一致。各種肝臟細(xì)胞生長(zhǎng)相關(guān)基因主要在

4、肝再生啟動(dòng)階段起始表達(dá)，在不同時(shí)期發(fā)揮作用。53％基因表達(dá)增強(qiáng)，38％基因減弱，9％基因表達(dá)不顯著，其中，參與肝臟干細(xì)胞、肝細(xì)胞、膽管上皮細(xì)胞、枯否氏細(xì)胞、肝內(nèi)皮細(xì)胞、肝星形細(xì)胞、陷窩細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)的135、348、295、133、222、100、156、156、151個(gè)基因中42、96、88、51、62、33、52、38、54個(gè)與肝再生相關(guān)。上述肝臟細(xì)胞肝再生相關(guān)基因都呈現(xiàn)均上調(diào)、上調(diào)占優(yōu)勢(shì)、均下調(diào)、下調(diào)占優(yōu)勢(shì)、上調(diào)

5、和下調(diào)相近等5種表達(dá)趨勢(shì)和17、29、12、19、27、23、20、9、23類(lèi)表達(dá)模式，除肝細(xì)胞外，參與膽管上皮細(xì)胞、枯否氏細(xì)胞、肝內(nèi)皮細(xì)胞、肝星形細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)的肝再生相關(guān)基因均呈現(xiàn)4組時(shí)間相關(guān)性。上述基因各形成103、244、211、185、144、29、98、69和68條關(guān)聯(lián)，其中，myc、fos、mapk8、akt1、igfbp1、crebbp等的關(guān)聯(lián)較多。 上述結(jié)果表明，Rat Genome 230