大黃對充血性心力衰竭的療效及作用機制研究.pdf

1、目的:
　　心力衰竭是多種心血管系統(tǒng)疾病的終末階段，具有較高的致死率，目前針對心力衰竭的治療主要以藥物治療為主，大黃作為我國傳統(tǒng)中藥，其新的治療效用不斷被開發(fā)，是新近的研究熱點所在，有研究報道大黃對心力衰竭具有一定的保護作用，本研究目的在于探究大黃對充血性心力衰竭的臨床療效及其治療機理。
　　方法:
　　本研究采用臨床實驗結(jié)合動物實驗，通過大黃對充血性心力衰竭患者的臨床治療，觀察其治療效果;通過動物實驗，探究其可能存在

2、的作用機理，全文實驗共分為四部分:①大黃對充血性心力衰竭保護機制臨床研究。本研究選用2014-2015年度鄭大二附院收治的心衰患者作為研究對象。對照組用藥:采用常規(guī)西藥治療;治療組用藥:在基礎(chǔ)治療的基礎(chǔ)上聯(lián)合大黃水煎液，每日上午10點給藥，給藥劑量按生大黃計10g/人/天，14天為一個治療周期。在治療一個周期后，分別測定治療組及對照組，心臟超聲指標(biāo):左室舒張末期內(nèi)徑(leftventricular end-diastolic dimen

3、sion，LVEDD)、左室心搏量(left ventricular strokevolume，LVSV)及左室射血分?jǐn)?shù)(Left ventricular ejection fraction，LVEF);B型尿鈉肽(brain natriuretic peptide，BNP)水平:腎素-血管緊張素-醛固酮(renin-angiotensin-aldosteronesystem，RAAS)系統(tǒng)相關(guān)指標(biāo):血管緊張素Ⅱ(Angiotensin

4、Ⅱ，AngⅡ)、醛固酮(aldosterone，ALD)含量及腎素(panel reactive antibodies，PRA)活性變化;測定血漿白細(xì)胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)含量的變化。②大黃對心力衰竭模型大鼠心功能和BNP的影響及機制研究。采用阿霉素制備心力衰竭大鼠模型。將大鼠隨機分成空白對照組、模型對照組和大黃高、中、低劑量組(

5、50 mg/kg、100 mg/kg和200 mg/kg)?？瞻讓φ战M每天腹腔注射生理鹽水0.3 ml，灌胃生理鹽水0.3 ml;模型對照組每天腹腔注射阿霉素10 mg/kg，灌胃生理鹽水0.3 ml;大黃低、中、高三劑量組大鼠每天灌胃大黃溶液0.3 ml(大黃濃度分別為50 mg/kg、100 mg/kg和200 mg/kg)，同時腹腔注射阿霉素10 mg/kg，給藥21天。心臟彩超測定左室舒張末期內(nèi)徑(left ventricula

6、r end systolic dimension,LVEDD)、左室收縮末期內(nèi)徑(leftventricular end diastolic dimension, LVESD)及LVEF;酶聯(lián)免疫吸附法測定血漿BNP水平;利用放射免疫分析法測定血漿及心肌組織中AngⅡ含量。③大黃對心力衰竭模型大鼠氧化應(yīng)激和炎性反應(yīng)的影響及其機制。阿霉素制備心力衰竭大鼠模型。將大鼠隨機分成正常對照組、模型對照組和大黃高、中、低劑量組(50 mg/kg、1

7、00 mg/kg和200 mg/kg))。正常對照組每天腹腔注射生理鹽水0.3 ml，灌胃生理鹽水0.3 ml;模型對照組每天腹腔注射阿霉素10 mg/kg，灌胃生理鹽水0.3 ml;大黃低、中、高三劑量組大鼠每天灌胃大黃溶液0.3 ml(大黃濃度分別為50mg/kg、100 mg/kg和200 mg/kg)，同時腹腔注射阿霉素10 mg/kg，給藥21天。Western blot法測定心肌組織超氧化物歧化酶(Superoxide Di

8、smutase，SOD)表達(dá)水平;雙抗體夾心ELISA法檢測血漿SOD、丙二醛(Malondialdehyde，MDA)、TNF-α、IL-6和C-反應(yīng)蛋白(C-reactionprotein，CRP)的濃度，電泳遷移率變動分析(eleetrophoretiemobilityshiftassays，EMSA)法測定NF-kB活性。④大黃對充血性心力衰竭模型大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響。心力衰竭大鼠模型采用腹主動脈縮窄法制備。將受試動物隨機分為

9、模型組、假手術(shù)組、大黃高、中、低劑量組(50 mg/kg、100 mg/kg和200 mg/kg))，每組20只，術(shù)后4周開始灌胃給藥，每日1次，連續(xù)給藥8周。模型組給予同體積生理鹽水，假手術(shù)組不進行藥物干預(yù)。TUNEL法測定心肌細(xì)胞凋亡情況;酶聯(lián)免疫法測定心肌組織炎性因子TNF-α及IL-6含量; EMSA法測定NF-kB活性，蛋白質(zhì)免疫印跡試驗法測定Bcl-2、Bax蛋白表達(dá);RT-PCR法測定Bcl-2、Bax、Caspase-3

10、的mRNA表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　?、傩乃セ颊咴诔Ｒ?guī)西藥治療的基礎(chǔ)上加用大黃后，LVEF、LVSV升高、LVEED降低;BNP、AngⅡ、ALD含量及PRA活性顯著下降; TNF-α及IL-6含量降低;患者心功能得到改善。②模型組大鼠較正常對照組大鼠LVEDD、LVESD顯著增大，LVEF減小，BNP和AngⅡ水平顯著上升。將大黃應(yīng)用于模型大鼠，大鼠LVEDD、LVESD減小，LVEF增大，BNP和AngⅡ水平顯著下降，并

11、在一定劑量范圍內(nèi)具有劑量依賴性。③模型組大鼠較正常對照組大鼠MDA、TNF-α、IL-6、CRP和NF-κB水平顯著上升，SOD活性顯著下降。將大黃應(yīng)用于心力衰竭大鼠，大鼠MDA、TNF-α、IL-6、CRP和NF-κB水平顯著下降，SOD活性顯著上升，并具有一定的劑量依賴性。④大黃干預(yù)后大鼠體內(nèi)炎性因子的水平顯著降低;NF-kB蛋白活性受到抑制，Bax、Caspase-3蛋白及mRNA表達(dá)減少，Bcl-2蛋白及mRNA表達(dá)增加，心肌細(xì)

12、胞凋亡率降低。
　　結(jié)論:
　?、俅簏S水煎液對充血性心力衰竭患者具有較好的治療和保護作用，能改善患者心功能，減輕左心室擴大程度，部分逆轉(zhuǎn)左心室重構(gòu)。其作用機制可能與降低體內(nèi)炎性因子水平、抑制腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)的激活有關(guān)。②大黃具有抑制心衰大鼠左心室擴大、降低大鼠血漿BNP水平，提高大鼠左心室收縮功能的功效，作用機制之一可能與其抑制RAAS系統(tǒng)活性有關(guān)。③大黃可能通過抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)和通過抑制NF-κB通路激活，進而