水稻病程相關(guān)PR1家族蛋白質(zhì)在葉片生長及與白葉枯病菌互作反應(yīng)中的表達(dá)研究.pdf

1、研究背景:植物受到病原菌侵染時大量表達(dá)的一類蛋白，稱為病程相關(guān)蛋白(Pathogenesis-related，PR)。目前，幾乎在所有植物中都有PR基因的報(bào)道，其廣泛存在提示著其重要性，有大量的實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明PR基因在植物抗病過程中發(fā)揮作用。PR1家族的基因經(jīng)常被作為抗病反應(yīng)的分子標(biāo)記。水稻是主要的糧食作物之一，也是研究單子葉植物的模式生物，而由黃單胞菌引起的白葉枯病可嚴(yán)重影響水稻的產(chǎn)量，甚至絕收，現(xiàn)在控制病害有效地方法，是培育抗病新品種

2、。水稻廣譜抗性基因Xa21可識別無毒決定子，從而介導(dǎo)水稻的免疫應(yīng)答。研究重要蛋白質(zhì)在水稻與白葉枯病菌互作過程中的表達(dá)特征，對鑒定Xa21抗病途徑和解析水稻白葉枯病菌的抗病機(jī)理具有重要意義。已有研究證明，PR1家族蛋白成員參與了水稻與白葉枯病菌互作的抗病途徑。
　　研究目的:制備PR1家族抗體，探究PR1家族蛋白質(zhì)在正常生長的水稻葉片中的表達(dá)變化，以及與白葉枯病菌互作過程的表達(dá)變化，比較PR1蛋白質(zhì)在不同處理下水稻葉片中的表達(dá)差異，

3、奠定了進(jìn)一步探究PR1家族蛋白質(zhì)功能的基礎(chǔ)。
　　材料方法:用黃單胞菌對水稻抗病材料和感病材料進(jìn)行接菌實(shí)驗(yàn)，同時接種蒸餾水作為對照，然后提取不同時間點(diǎn)的接菌葉片。制備多克隆抗體，采用Western Blotting技術(shù)檢測PR1家族蛋白質(zhì)在不同時間點(diǎn)和不同處理下水稻葉片中的表達(dá)豐度。
　　結(jié)果:在正常生長過程中，PR1＃012、PR1＃021、PR1＃022、PR＃051、 PR1＃071和PR1＃072主要是在苗期表達(dá)量低

4、，隨著葉片的生長表達(dá)量逐漸升高，一般在生長旺盛時期表達(dá)量最高，在成熟期葉片中略有下降，而PR1＃052和PR1＃073在苗期表達(dá)量相對較高，成熟期呈現(xiàn)下降，未檢測到PR1＃121蛋白質(zhì)的表達(dá);在Xa21介導(dǎo)的抗白葉枯病菌過程中，PR1＃012、PR＃051、PR1＃052、PR1＃072、PR1＃073和PR1＃121等6個蛋白質(zhì)在抗病反應(yīng)后期呈現(xiàn)上調(diào)或誘導(dǎo)表達(dá)，而PR1＃071表現(xiàn)下調(diào);在抗、感和對照(Mock)反應(yīng)中，抗、感表達(dá)豐度