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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:在體外培養(yǎng)的髁突軟骨細(xì)胞和股關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞基礎(chǔ)上,加載一定時(shí)間的壓力,比較兩種軟骨細(xì)胞Ⅱ型膠原的合成,從細(xì)胞外基質(zhì)成分方面探索壓力對(duì)不同關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的影響差異,利用關(guān)節(jié)軟骨生物力學(xué)特性對(duì)治療骨關(guān)節(jié)病或錯(cuò)頜畸形等疾病的關(guān)節(jié)軟骨重建或改建的方法進(jìn)行初步探討。
方法:通過機(jī)械加酶聯(lián)合消化法,將2周齡的SD雄性大鼠來源的髁突軟骨和股關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞分離并體外單層培養(yǎng),建立其分別的有限細(xì)胞系,用Ⅱ型膠原的免疫組化來鑒定關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞。
2、對(duì)兩種第三代軟骨細(xì)胞加載0.01MPa的靜壓力,實(shí)驗(yàn)壓力加載時(shí)間分為0.5h,3h,12h,以兩種細(xì)胞分別加載以上不同的壓力時(shí)間為實(shí)驗(yàn)組,對(duì)照組的軟骨細(xì)胞不進(jìn)行壓力的加載,除了加力時(shí)間不同外,其余實(shí)驗(yàn)條件均相同。用逆轉(zhuǎn)錄PCR的方法檢測(cè)各標(biāo)本Ⅱ型膠原的表達(dá),統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,用t檢驗(yàn),比較各組數(shù)據(jù)間的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:在0.01MPa靜壓力下,加力0.5h后,髁突軟骨細(xì)胞和股關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞Ⅱ型膠原表達(dá)略有增加,對(duì)照組也有少量增加
3、,三者無明顯差別;加力3h后,髁突軟骨細(xì)胞和股關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞分別與對(duì)照組相比,均有明顯Ⅱ型膠原表達(dá)的增高,且與對(duì)照組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,而髁突軟骨細(xì)胞與股關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞之間的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,髁突軟骨細(xì)胞Ⅱ型膠原比股關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的表達(dá)略高;加力12h后,髁突軟骨細(xì)胞和股關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞分別與對(duì)照組比較,都有顯著地Ⅱ型膠原表達(dá)降低(p<0.05),且髁突軟骨細(xì)胞下降趨勢(shì)高于股關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞,但這兩者間的比較結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
結(jié)論
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