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1、第一部分有生物活性的人工神經(jīng)導(dǎo)管的研究 目的:利用GDNF基因轉(zhuǎn)染的雪旺氏細胞和PLGA管共培養(yǎng)構(gòu)建具有生物活性的人工神經(jīng)導(dǎo)管。 材料和方法:利用乳鼠臂叢神經(jīng)和坐骨神經(jīng)取材,雙酶消化法培養(yǎng)雪旺氏細胞,經(jīng)阿糖胞苷抑制成纖維細胞和差數(shù)貼壁,培養(yǎng)出高純度和高濃度的雪旺氏細胞。PcDNA3.1(+)/GDNF質(zhì)粒通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)入雪旺氏細胞。轉(zhuǎn)染的雪旺氏細胞擴增達到一定數(shù)量后,用微注射和共培養(yǎng)法,與PLGA管構(gòu)建有生物活性的人工
2、神經(jīng)導(dǎo)管。通過光鏡和掃描電鏡檢測雪旺氏細胞的生長情況。 結(jié)果:成功培養(yǎng)出雪旺氏細胞,并轉(zhuǎn)入GDNF基因。轉(zhuǎn)染的雪旺氏細胞與PLGA管復(fù)合,構(gòu)建出有生物活性的人工神經(jīng)導(dǎo)管。 結(jié)論:GDNF基因轉(zhuǎn)染的雪旺氏細胞可與PLGA管共同構(gòu)建有生物活性的人工神經(jīng)導(dǎo)管。 第二部分有活性的人工神經(jīng)導(dǎo)管修復(fù)面神經(jīng)的動物實驗研究 目的:評價轉(zhuǎn)染的雪旺氏細胞與PLGA管復(fù)合構(gòu)建的人工神經(jīng)導(dǎo)管在修復(fù)面神經(jīng)缺損方面的優(yōu)勢。
3、 材料與方法:將30只SD大鼠隨機分成3組,分別用直接縫合(A組),未轉(zhuǎn)染的雪旺氏細胞與PLGA管(B組),轉(zhuǎn)染的雪旺氏細胞與PLGA管修復(fù)面神經(jīng)缺損(C組)。術(shù)后2周,1月,2月,3月分別進行大體觀察,檢測手術(shù)側(cè)的面神經(jīng)肌電圖,之后修復(fù)段取材,經(jīng)H-E染色后,進行有髓神經(jīng)纖維計數(shù)和髓鞘厚度測量。數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS11.5進行統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果:C組的面神經(jīng)肌電圖叫A,B組恢復(fù)快,且差異有統(tǒng)計學(xué)意義;A,B組之間神經(jīng)肌電圖無
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