高脂飲食引起肌少癥的機制研究.pdf

1、目的:隨著社會經濟的發(fā)展，膳食結構逐漸西方化，代謝綜合征及心腦血管疾病發(fā)病率急劇上升，高脂飲食(HFD)被認為是威脅人類健康的重要危險因素之一。近年來，因高脂飲食對老化的九個標志都有影響，能促進老化相關性疾病的發(fā)生，如肌少癥，被認為是老化加速器。肌少癥(Sarcopenia)作為以骨骼肌質量及其力量的下降為特征的新的老年綜合征，是老年人軀體功能障礙，生活質量下降及跌倒、衰弱、失能及死亡的重要危險因素，逐漸受到重視。隨著老化，肌蛋白平衡傾

2、向肌肉降解一方，更為重要的是，骨骼肌的再生、修復能力明顯減退。目前認為負責骨骼肌再生主要為骨骼肌干細胞，通過增殖、分化修復老化過程中的慢性損傷。隨著研究的進展，有效增強骨骼肌干細胞的增殖及分化功能，可成為延緩肌少癥的有效手段。
　　方法:體內研究方面:建立高脂喂養(yǎng)C57/B65月小鼠模型，進一步分析西方生活式（高脂飲食）對小鼠肌纖維量及力量的影響。使用雙能X線儀檢測小鼠體內肌肉、脂肪組織，并計算其含量;使用小鼠抓力儀測定小鼠抓力;

3、分離腓腸肌(Gas)及脛骨前肌(TA)，用蘇木糖-伊紅(H&E)染色觀察比較肌纖維橫截面積大小;熒光定量PCR測定老化基因腫瘤抑制基因(P53、P16)，肌降解蛋白泛素蛋白連接酶E3s(MuRF-1)，炎癥相關指標(IL-6、TNFα)及11β-羥基類固醇脫氫酶(11β-HSD1)。
　　體外研究方面:使用不同濃度棕櫚酸(PA)干預肌肉干細胞分化，分析游離脂肪酸對肌肉干細胞分化及功能的影響。在小鼠骨骼肌干細胞誘導分化后，同時予PA

4、及BVT干預，用熒光染色法、熒光定量PCR測定成肌基因肌球蛋白重鏈(MyHC)表達;seahorse能量代謝儀檢測細胞的氧耗增加率;熒光定量PCR檢測線粒體融合基因線粒體融合素基因1(Mfn1)、視神經萎縮癥蛋白基因(Opa1)和裂解基因發(fā)動相關因子基因(Drp1)、線粒體分裂素基因1(Fis1)的相對表達量。
　　結果:動物實驗中發(fā)現(xiàn)高脂飲食組小鼠，脂肪組織增加明顯，肌間出現(xiàn)脂肪組織沉積，骨骼肌纖維變細，而且小鼠抓力相對減少。熒

5、光定量PCR測定老化基因腫瘤抑制基因P16升高，肌降解蛋白泛素蛋白連接酶E3s（Atrogin-1和MuRF-1）均增加，高脂誘發(fā)IL-6、TNFα為代表的炎癥指標增加，11-βHSD1基因表達量增加。
　　體外實驗發(fā)現(xiàn)肌肉干細胞給予不同濃度PA刺激后，PA100umol/l時MyHC表達量少，11β-HSD1含量較高;給予PA刺激后MyHC熒光表達量下降，肌小管融合率減低，用seahorse能量代謝儀檢測細胞的氧耗增加率Oxyg

6、enconsumption rates(OCR)發(fā)現(xiàn)細胞線粒體氧化呼吸功能受抑制，且線粒體融合/裂解比值下降，裂解基因增加。而加入11β-HSD1特異性抑制劑BVT.2733后，肌小管融合率增加;細胞氧化呼吸能力改善;線粒體融合/裂解比值增加，裂解基因表達下降。
　　結論:高脂飲食促使身體成分改變，脂肪組織明顯增加，骨骼肌纖維變細，肌肉力量減退。高脂飲食加重骨骼肌萎縮、老化，增強肌肉組織內炎癥反應。而且抑制肌肉干細胞分化、影響線粒