姜黃素對DSS誘導小鼠潰瘍性結(jié)腸炎的作用機制的研究.pdf

1、目的:通過姜黃素干預DSS誘導小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型，檢測p-STAT3蛋白、STAT3mRNA的表達量，從而探討姜黃素通過STAT3通路對小鼠UC的作用，以及姜黃素對環(huán)氧合酶-2(COX2)、過氧化物酶體增殖物激活受體(PPARγ)的影響。
　　方法:將雌性BALB/c小鼠60只，體重15-25g，按隨機表分為A、B、C、L、M、H六組，每組10只， A組:正常對照組;B組:模型組;C組:地塞米松干預組（1.5mg/kg.d）;L

2、組:姜黃素低劑量組（25mg/kg.d）;M組:姜黃素中劑量組（50mg/ kg.d）;H組:姜黃素高劑量組(100mg/kg.d)。A組小鼠每日自由飲水，其余組小鼠連續(xù)自由飲用5％DSS溶液7天，在造模的同時每日給予小鼠腹腔注射藥物，A組注射等體積生理鹽水，B組注射2.5％乙醇溶液，C組注射地塞米松，L、M、H組分別注射上述低、中、高劑量姜黃素。每日稱重，并觀察小鼠的進食、活動、毛色及大便形狀，以及觀察大便隱血情況，進行疾病活動指數(shù)評

3、分。造模第8天處死全部小鼠，取出結(jié)腸宏觀觀察后，一部分用于包埋切片，做HE染色觀察結(jié)腸組織學改變，以及免疫組化測PPARγ、STAT3。三部分組織放于液氮中備用，取一份用于ELISA測COX-2的表達，一份用于Western blot測p-STAT3的表達，一份用于RT-PCR測STAT3mRNA的表達。
　　結(jié)果:1.B組小鼠癥狀、組織學都符合UC標準，DAI評分和組織學評分均高于A組，C、L、M、H組DAI評分和組織學評分較B

4、組都有不同程度的下降。2.免疫組織化學結(jié)果:B組小鼠結(jié)腸PPARγ（23.00±5.92）低于A組（41.14±9.56），差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)， C組（64.27±20.41）、L組（30.74±7.67）、M組（36.86±16.79）、H組（63.84±20.74）高于B組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，C組與H組差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);B組小鼠結(jié)腸STAT3（27.15±11.91）較A組(67.12±

5、17.04)、C組（29.94±10.38）、L組(44.21±12.84)、M組（29.16±9.03）、H組（20.44±7.30）高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，M組與C組差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。3.ELISA測COX-2結(jié)果:與B組相比，C、L、M、H組COX-2含量較B組低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。與C組相比，L、M組COX-2含量比C組低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，H組評分與C組差異統(tǒng)計學無

6、意義(P＞0.05)。于L組相比，M、H組含量低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。M組與H組相比，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。4.Western blot檢測小鼠結(jié)腸p-STAT3蛋白的表達:B組p-STAT3蛋白水平相比A組明顯上升，C、L、M、H組水平較B組降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。5.RT-PCR方法檢測結(jié)腸組織STAT3 mRNA的表達:B組STAT3 mRNA表達水平相比A組明顯上升，C、L、M、H組水平