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1、華南理工大學(xué)碩士學(xué)位論文維生素E合成途徑關(guān)鍵酶基因的克隆及轉(zhuǎn)基因植株構(gòu)建姓名：葉從勇申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：發(fā)酵工程指導(dǎo)教師：鄭穗平20090401ABSTRACTAmaranthuscaudatusLinn，anannualherb，isverynutritiousandcontainsahighqualityofvitaminsandaproteinthatisrichintheaminoacidlysineItalsocontai
2、nsgoodquantitiesofcalcium，phosphorus，iron，potassium，zincandSOoninseedTheleavesandrootshavemanymedicalpropertiesandCanbeusedassilageforanimalsProfitingfromtheresearchesonthevitaminEbiosyntheticpathwaysinplantinrecentyears
3、，twokeyenzymesinvolvedintocopherolsynthesisinArabidopsiswereclonedAndbyusingAgrobacteriumTumefaciensLBA4404，harboringrecombinedpBI121plasmid，asdonorstrains，Ytocopherolmethyltransferase(YTMT／vte4)wasintroducedintoAmaranth
4、uscaudatus，expectingthatthelevelsofvitaminEinAmaranthuscaudatusCanbeelevatedspeciallythelevelofa—tocopherol，SOthatmoreeconomicvalueisaddedtothecropandthestandardofhumanhealthandnutritionCanbeimprovedThemainresearchworkan
5、dresultsareasfollows：1Theeffectsof6BAandNAAinmediumoncotyledonarynodeswerestudiedtoestablishthehighfrequencyregenerationsystemofAmaranthuscaudatusTheresultsshowedthattheoptimalmediumcompositionsforbudsregenerationfromcot
6、yledonnodesWasMS30mg／L6BA3％sucrose08％agarandtheoptimalmediumcompositionsforsegementproliferationWasMSI0mg／L6BA02mg／LNAA3％sucrose08％agar，pH=58。2TotalRNAwasisolatedfromshootsof2一weekoldArabidopsisthalianaplantsandtheeDNAof
7、Arabidopsishomogentisatephytyltransferasephytyltransferase(HPT／vte2)andYtocopherolmethyltransferase(Y—TMT／vte4)WaspreparedbytwostepRT—PCRandthenreplacethegusgeneonpBll21plasmidtoconstructtwecombinedplasmidsnamedpBI121一HP
8、TandpBI121TMTrespectively，whichweretransformedintoLBA44043TheeffectofCefotaxime(Cef)onLBA4404andcotyledonarynodeswerestudiedTheconcentrationgradientexperimentshowedthattheCefcouldrestrainthegrowingofLBA4404whenitsconcent
9、rationreaches300mgfLormore，whichWasthetolerantconcentrationforAmaranthuscaudatus；150mg／LKaninMSmediumWasthecriticalsensitiveconcentrationforbudsregenerationfromcoty’ledonnode；ThetransformationefficiencyWOuLdbeincreasedob
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