寶樂果(Borojo)多糖的提取與分離純化及其藥理活性的研究.pdf

1、目的：
　　研究寶樂果中多糖(BP)的結(jié)構(gòu)、藥理作用和構(gòu)效關(guān)系，有助于進一步闡明寶樂果豐富的藥理活性，把寶樂果進一步開發(fā)成為食品添加劑或保健食品。
　　方法：
　　寶樂果多糖的提取
　　在單因素試驗的基礎(chǔ)上，采用正交試驗法對寶樂果多糖(BP)的超高壓提取工藝進行優(yōu)選，選用L9(34)進行正交試驗，以寶樂果多糖(BP)提取率為指標，研究超高壓壓力、溫度、提取次數(shù)和料液比對寶樂果多糖(BP)提取率的影響。
　　

2、寶樂果多糖的分離純化與其中的中性多糖表征結(jié)構(gòu)分析
　　選擇了離子交換色譜法，凝膠色譜法，膜透析法，高效凝膠色譜法等方法分離純化寶樂果中多糖(BP)，并用紅外光譜、紫外光譜、核磁共振譜、氣質(zhì)聯(lián)用儀和各種化學反應等方法對其中的中性多糖(BP1s)的結(jié)構(gòu)表征進行鑒定。
　　寶樂果多糖的藥理活性研究
　　本部分實驗選擇了體外α-葡萄糖苷酶活性實驗方法來評價寶樂果多糖(BP)的體外降血糖活性和選擇免疫功能低下小鼠為實驗對象評價寶

3、樂果多糖(BP)的體內(nèi)免疫活性，并對寶樂果中的中性多糖(BP1s)進行了硫酸化，并用MTT法評價了其硫酸化衍生物(S-BP1s)的體外抗腫瘤活性。
　　結(jié)果：
　　通過壓力、溫度、料液比、提取次數(shù)等單因素試驗，然后進行正交優(yōu)化，得出影響超高壓提取寶樂果多糖得率的大小順序是:料液比＞溫度＞提取次數(shù)＞壓力，最佳提取條件為:壓力1500 MPa，溫度30℃，料液比1∶10 g/mL，提取1次，多糖提取率可達8.28％。
　　

4、寶樂果多糖經(jīng)過DEAE Sepharose Fast Flow的分離得到了三個組分:中性多糖組分(BP1s)和非中性多糖組分(BP2s和BP3s)，利用Superdex200 prep grade成功分離了中性多糖組分，得到四個中性多糖組分(BP1-1，BP1-2，BP1-3和BP1-4)，并確定它們都是線性β-1，4-D-半乳聚糖。
　　寶樂果多糖(BP)無體外降血糖活性，有提高免疫力活性，對其中的中性多糖進行硫酸化修飾后其衍生

5、物(S-BP1s)有體外抗腫瘤活性。
　　結(jié)論：
　　寶樂果中富含多糖成分，達到8.28％;其多糖成分(BP)中中性多糖組分(BP1s)的含量很多，其中性多糖(BP1s)中含四個多糖組分(BP1-1，BP1-2，BP1-3和BP1-4)，其結(jié)構(gòu)都是β-1，4-D-半乳聚糖，我們對中性多糖進行硫酸化后發(fā)現(xiàn)其衍生物(S-BP1s)有體外抗腫瘤活性;寶樂果多糖(BP)具有體內(nèi)提高免力的活性，不具有體外降血糖活性。本論文的研究結(jié)果能