環(huán)境煙霧暴露誘發(fā)特定機(jī)體損傷的動(dòng)物模型研究.pdf

1、目的：香煙煙霧是室內(nèi)空氣環(huán)境的主要污染物之一，誘發(fā)了多種疾病。其化學(xué)成分極其復(fù)雜，目前通常采用Ames試驗(yàn)、微核分析、中性紅細(xì)胞毒性試驗(yàn)等體外方法進(jìn)行毒性分析，探索誘發(fā)特定機(jī)體損傷的動(dòng)物模型評(píng)價(jià)方法已成為當(dāng)務(wù)之急。本文參考國(guó)際煙草科學(xué)研究合作中心（CORESTA）推薦的方法，以不同品種的煙草卷制的單料煙為材料，通過(guò)體外 Ames試驗(yàn)和煙熏 SD大鼠構(gòu)建慢性阻塞性肺疾?。–OPD）動(dòng)物模型，旨在為揭示復(fù)雜環(huán)境空氣污染物的毒性機(jī)制與健康危害

2、提供理論依據(jù)。
　　方法：對(duì)3個(gè)煙草品種CS-1、CS-2和CS-3，利用Ames試驗(yàn)分析其煙霧提取物（CSE）對(duì)TA97、TA98、TA100和TA102標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試菌株的基因毒性；將清潔級(jí)雄性SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組（CS-1、CS-2和CS-3），連續(xù)煙熏8周構(gòu)建COPD模型。分別于暴露14、28和56 d后，H.E.染色觀察肺組織和氣管的病理學(xué)和形態(tài)學(xué)變化；檢測(cè)肺組織（ROS、SOD、GSH-Px、MDA、PCO和 DP

3、C）和血清（SOD、GSH-Px和MDA）中的氧化應(yīng)激標(biāo)志物；ELISA檢測(cè)BALF和血清中MMP-9、TIMP-1和TGF-β1的水平。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　?。?）Ames試驗(yàn)結(jié)果顯示，添加代謝活化物S9能增加CSE的致突變性。 CS-1、CS-2和CS-3香煙煙霧提取物存在顯著的基因毒性效應(yīng)差異，其致突變能力大小依次為：CS-1＞CS-2＞CS-3。
　?。?）煙霧暴露56 d后，CS-1、CS-2和CS-3實(shí)

4、驗(yàn)組大鼠出現(xiàn)了典型的COPD病理特征：肺組織及支氣管周?chē)写罅垦装Y細(xì)胞聚集、浸潤(rùn)，氣道重塑明顯；氣管呈現(xiàn)炎癥細(xì)胞聚集，偶有粘膜上皮細(xì)胞脫落。半定量病理分析顯示，實(shí)驗(yàn)組肺泡平均內(nèi)襯間隔（MLI）、支氣管壁厚度（Wat）、平滑肌層厚度（Wam）較對(duì)照組均顯著增高（P＜0.05），平均肺泡數(shù)（MAN）變化較對(duì)照組顯著性降低（P＜0.05）。
　?。?）隨著染毒時(shí)間的延長(zhǎng)，煙熏大鼠肺組織中 SOD、GSH-Px活力及 ROS、MDA和PC

5、O水平較對(duì)照組顯著增高（P＜0.05），DPC水平變化不顯著（P＞0.05）。煙熏大鼠血清中GSH-Px活性和MDA的水平較正常組顯著性的升高（P＜0.05），而SOD活力無(wú)顯著性變化。
　?。?）與對(duì)照組比較，染毒56 d后，煙熏大鼠BALF及血清中MMP-9、TIMP-1和TGF-β1的表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組（P＜0.05），而MMP-9/TIMP-1均低于對(duì)照。
　　上述指標(biāo)在CS-1、CS-2與CS-3實(shí)驗(yàn)組間存在一