化痰散結法對感染血吸蟲小鼠肝纖維化的干預.pdf

1、目的：探討化痰散結法對血吸蟲肝纖維化模型小鼠肝功能、肝組織中纖維連接蛋白、18kD轉位蛋白（TSPO）表達的影響，并探究其作用機制，為中醫(yī)藥從“痰”論治肝纖維化提供試驗依據。
　　方法：采用血吸蟲尾蚴感染正常BALA/c小鼠建造血吸蟲肝纖維化模型，并制備50mg/kg、100mg/kg、150mg/kg低、中、高三種劑量化痰散結組方（浙貝母、漏蘆乙醇提取物）中藥藥液，隨機將小鼠分為正常組（A組）、模型組（B組）、化痰散結組方低劑量

2、組（C組）、中劑量組（D組）和高劑量組（E組）。于第6周開始分別對C、D、E組小鼠采用化痰散結組方低、中、高三種劑量中藥藥液灌胃治療，A組和B組小鼠采用蒸餾水灌胃治療，治療周期為8周。治療結束,對所有小鼠采取眼球取血方式留取標本并利用生化分析儀檢測血清ALT、AST含量，然后采用頸椎脫臼法處死小鼠留取3小塊黃豆大小肝組織分別行HE染色觀察各組小鼠肝臟病理變化、RT-PCR法檢測纖維連接蛋白FNmRNA表達量和WestBlot檢測TSPO

3、表達量。
　　結果：
　　1.于第6周取模型組小鼠肝臟組織切片HE染色后顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)小鼠肝組織中蟲卵肉芽腫和再生結節(jié)形成，匯管區(qū)纖維結締組織增生，炎癥反應明顯，證明血吸蟲肝纖維化模型建造成功。
　　2.治療結束后，模型組小鼠血清ALT、AST含量較正常組明顯升高，差異有顯著意義（P＜0.01）；而化痰散結組方低、中、高劑量組較模型組相比，小鼠血清中ALT、AST下降，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；化痰散結組方低

4、、中、高劑量組三者之間血清ALT、AST比較，其差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），其中以高劑量組小鼠血清ALT、AST降低最為明顯，中劑量組次之。
　　3.治療結束后，化痰散結組方低、中、高劑量組與模型組相比，小鼠肝組織中蟲卵肉芽腫平均面積縮小，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；化痰散結組方低、中、高劑量組之間比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），其中以高劑量組蟲卵肉芽腫平均面積縮小最為明顯，中劑量組次之。
　　4.治療結

5、束后，模型組與正常組比較，小鼠肝組織中FNmRNA表達量明顯升高，差異有顯著意義（P＜0.01）；化痰散結組方低、中、高劑量組與模型組相比，小鼠肝組織中FNmRNA表達量降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；化痰散結組方低、中、高劑量組之間比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），其中以高劑量組FNmRNA表達量降低最為明顯，中劑量組次之。
　　5.治療結束后，模型組與正常組比較，小鼠肝組織中TSPO表達量明顯升高，差異有顯著意義

6、（P＜0.01）；化痰散結組方低、中、高劑量組與模型組相比，小鼠肝組織中 TSPO表達量降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；化痰散結組方高劑量組分別與中、低劑量組比較，小鼠肝組織中TSPO表達量降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；化痰散結組方中、低劑量組之間比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　結論：
　　1.采用血吸蟲感染小鼠一般在6周左右能建成血吸蟲肝纖維化模型，且感染尾蚴一般以15條左右為宜。