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文檔簡介
1、目的:檢測HBV感染患者不同病程階段(包括慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化(LC)及慢加急性肝衰竭(ACLF))血清IL-27變化,分析其血清IL-27變化與IFN-γ、肝功能檢測指標及HBV免疫學指標等之間的關系,從而探討IL-27在CHB病情進展中的作用,為IL-27應用于臨床CHB病情監(jiān)測及指導用藥提供科學依據。
方法:
1、研究對象:CHB患者89例,其中輕度組(light chronic hepatitis
2、B,CHB-1)31例,中度組(moderate chronic hepatitis B,CHB-m)51例,重度組(severe chronic hepatitis B,CHB-s)7例;HBV感染相關肝硬化(livercirrhosis,LC)患者41例(代償期(compensatory liver cirrhosis,LC-c)患者12例,失代償期(decompensatory liver cirrhosis,LC-d)患者29例
3、);HBV感染相關慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure,ACLF)患者36例;健康體檢者10例作為對照組。
2、生化專用試管取清晨空腹靜脈5ml,離心、收集血清后置于-80℃,其余血樣送檢驗科進行肝功能及免疫學檢查,主要檢測ALT、TBIL、ALB等肝功能指標及HBV相關病毒指標。同時采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(Real-time PCR)法,嚴格按試劑盒說明書要應用Real-time
4、 PCR檢測血清中HBV-DNA水平。同時凝血功能專用試管另取5ml外周血進行凝血酶原活動度(prothrombin time activity, PTA)檢測,以上均由專職檢驗人員操作。
3、采用酶聯免疫吸附法(ELISA法)檢測,參照人IL-27、IFN-γ檢測試劑盒說明書,每孔加入50μl標準品或待測樣品,在450nm波長處測定各孔的光密度值(OD值),并根據標準孔數值繪制標準曲線,計算待檢樣品中IL-27、IFN-γ的
5、含量。
4、常規(guī)病理檢測患者肝臟纖維化及炎癥反應程度:本組中有57例CHB患者進行肝臟穿刺組織病理活檢,方法按照臨床常規(guī)流程進行。
5、對血清IL-27含量與IFN-γ含量及各類患者外周血血清中肝功能檢測指標的相關性進行分析。同時分析不同血清ALT含量、不同HBV-DNA復制程度、不同肝臟炎癥及纖維化程度患者外周血清中IL-27含量差異及其意義。
結果:
1、各組患者外周血血清中肝功能指標、IL-
6、27、IFN-γ水平比較
不同程度CHB、LC及ACLF患者血清中ALT、AST、TBIL、IL-27、IFN-γ的水平均顯著高于對照組(P<0.01),PTA則明顯低于對照組(P<0.05)。
2、各組患者血清IL-27含量與血清中IFN-γ含量及肝功能各指標相關性分析
CHB、LC及ACLF患者血清中IL-27含量分別與IFN-γ、肝功能指標(ALT、TBIL、ALB)及PTA的表達水平呈明顯相關性(P
7、<0.05),且IL-27含量與ALT、TBIL及IFN-γ含量明顯呈正相關(P<0.05),而與PTA及ALB含量則明顯呈負相關(P<0.05)。
3、血清IL-27與肝組織炎癥分級的關系
57例行肝穿刺活檢術慢乙肝患者,血清IL-27較健康對照組患者明顯增高(P<0.05),IL-27值并未隨著肝臟炎癥等級升高而升高,各組之間差別無統計學意義(P>0.05)。
4、血清IL-27與肝組織纖維化的關系
8、r> 行肝穿刺活檢術患者中有56例肝臟出現不同程度的纖維化,患者血清IL-27均較健康對照組患者明顯增高(P<0.05),但各組血清IL-27水平與肝臟纖維化分級無關(P>0.05)。
5、血清IL-27與ACLF患者預后的關系
本組36例ACLF患者中,存活11例,死亡25例。存活組患者血清IL-27均值低于死亡組,但差異無統計學意義(P>0.05)。
6、血清IL-27與MELD評分的關系
9、將LC-c、LC-d及ACLF患者進行MELD評分,分析血清IL-27與MELD評分的關系。結果顯示,MELD>40組與MELD≤40組比較,IL-27含量明顯增高,組間差別有統計學意義(P<0.05)。
7、血清IL-27與HBeAg的關系
本組患者中,HBeAg(+)90例,HBeAg(-)86例。統計學分析結果顯示,HBeAg陽性組與陰性組比較,血清IL-27水平差別無統計學意義(P>0.05)。
8
10、、血清IL-27與HBV復制的關系
根據HBV載量不同分為HBV-DNA<5log10 copies/ml60例,5≤HBV-DNA≤7log10copies/ml69例,HBV-DNA>7log10copies/ml47例。方差分析結果顯示,三組之間兩兩比較血清IL-27水平差別無統計學意義(P>0.05)。
結論:
1、IL-27可促進Th1型細胞免疫應答,增加IFN-γ的表達,同時可能是HBV感染患者
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