低能離子誘變選育植物乳桿菌高產(chǎn)CLA菌株的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究以一株產(chǎn)共軛亞油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)的植物乳桿菌為出發(fā)菌株,以10 kev氮離子對出發(fā)菌進行多次誘變選育,以期得到一株高產(chǎn)CLA的誘變菌株,并且對該誘變菌株適宜產(chǎn)CLA的條件進行了研究,同時為了比較出發(fā)菌株和誘變菌株在分子水平的差異,利用30條隨機引物對出發(fā)菌株和誘變菌株進行了RAPD比較分析,并且應(yīng)用SDS-PAGE技術(shù)作為研究出發(fā)菌株和誘變菌株遺傳突變分析的輔助手段。主要研究結(jié)果如下:

2、
   1.在注入能量為10 keV,劑量為0(對照)~120×2.6×1013ions/cm2條件下對出發(fā)菌株ANCLA02進行誘變,結(jié)果表明:存活曲線與文獻報道的“馬鞍型”曲線基本符合。注入誘變高產(chǎn)CLA菌株的適宜劑量為60×2.6×1013N+/crr12。篩選獲得的誘變菌株ANCLA02的CLA產(chǎn)量為106.67μg/mL,比出發(fā)菌株提高了1.5倍。誘變菌株經(jīng)5代培養(yǎng),產(chǎn)CLA性能穩(wěn)定。
   2.對誘變菌株適宜

3、產(chǎn)CLA條件進行了初步研究,得到植物乳桿菌的最適產(chǎn)CLA條件為:亞油酸為誘導(dǎo)物,并且亞油酸添加量為0.1%,菌株的接種量為4%,初始PH為6.5,在37℃條件下發(fā)酵培養(yǎng)24小時,可使CLA產(chǎn)量達到最大。
   3.將出發(fā)菌株和誘變菌體進行全細胞蛋白電泳,比較出發(fā)菌株和誘變菌株菌體內(nèi)蛋白質(zhì)表達的差異,結(jié)果顯示:出發(fā)菌株和誘變菌株在全細胞蛋白的表達上無差異。
   4.本試驗共選用了30條隨機引物,用他們對出發(fā)菌株和誘變菌株

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