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文檔簡介
1、活性氧(Reactive oxygen species,ROS)是機體正常的代謝產(chǎn)物,但其活性具有兩面性。低含量的ROS 對機體具有一定積極的生理作用。但當其產(chǎn)生和清除之間的平衡遭到破壞時,造成氧化脅迫,這與許多疾病都有密切關(guān)系。天然抗氧化劑作為機體抗氧化非酶系統(tǒng)的成分,可直接清除活性氧;還可抑制活性氧的產(chǎn)生;或通過作用于抗氧化反應(yīng)元件而提高內(nèi)源性抗氧化物質(zhì)的水平或抑制氧化酶的表達而減少活性氧的產(chǎn)生。因此,抗氧化劑的介入,可能會有效防治
2、ROS相關(guān)疾病的發(fā)生和發(fā)展。
本文對五種天然產(chǎn)物的抗氧化活性進行了檢測;測定了兩種三萜化合物抑制細胞氧化損傷的活性,并對它們的作用進行了深一步的探討。
在對五種天然產(chǎn)物茜素紅(Aliarin red,AR)、白藜蘆醇(Resveratrol,Res)、阿魏酸(Ferulic acid,F(xiàn)A)、葛根素(Puerarin,Pue)和芹菜素(Apigenin,Api)進行體外抗氧化活性的檢測中,采用甲基紫比色法、M
3、DA 法和SDS-PAGE,檢測了它們清除羥自由基的能力、對脂質(zhì)過氧化及蛋白質(zhì)氧化的保護作用。結(jié)果表明,五種化合物在不同的反應(yīng)體系中表現(xiàn)出不同的抗氧化活性。茜素紅清除HO·的能力及對蛋白質(zhì)氧化的保護作用最強,白藜蘆醇對脂質(zhì)過氧化的抑制作用最強。其中茜素紅具有較強的抗氧化活性,其有可能成為一種植物源性的抗氧化劑。
齊墩果酸(Oleanolic acid,OA)和熊果酸(ursolic acid,UA)是廣泛存在于植物界有相似
4、化學結(jié)構(gòu)的三萜化合物,因其廣泛的生物學活性和低毒性備受治療學的青睞。本文采用過氧化氫對肝癌HepG2 細胞氧化損傷模型,在細胞水平對這兩個三萜化合物對細胞氧化損傷的保護作用進行了比較研究。采用單細胞凝膠電泳法測定化合物對細胞DNA氧化損傷的保護作用;檢測了它們對細胞中脂質(zhì)過氧化及蛋白質(zhì)氧化損傷的保護作用;并檢測了對細胞中谷胱甘肽(GSH)含量、抗氧化酶SOD、CAT、Gpx活性的影響。
結(jié)果表明OA和UA在5-20 μmo
5、l/L 均能明顯抑制Fe2+誘發(fā)的細胞脂質(zhì)過氧化作用,并呈濃度依賴性。在濃度為20μmol/L 時,OA和UA 對MDA 產(chǎn)生的抑制率分別達到38%和35%。這兩種化合物在濃度5-20 μmol/L 范圍均能降低蛋白質(zhì)羰基含量,抑制蛋白質(zhì)氧化損傷;減輕HepG2 細胞DNA所受氧化損傷。當用300 μmol/L 濃度過氧化氫處理細胞時GSH含量下降到正常組的36.7%,用5、10和20 μmol/L的UA和OA 兩種三萜預(yù)先進行處理時,
6、都可使GSH 濃度有一定回升,隨著濃度的增高保護作用也提高,并且OA 比UA的作用強。濃度為20 μmol/L時,OA和UA可使GSH的含量分別提高到氧化脅迫前的78%和74.6%。
H2O2 誘導的氧化脅迫使HepG2 細胞的GPx、SOD、CAT 酶活性均有所下降,OA和UA處理后使酶活性升高,當濃度為20μmol/L 時,和對照組相比OA和UA 使GPx 酶活性分別升高了16.1%和13.3%,使CAT 酶活性分別升
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