基于腎上腺素能受體研究肝郁-心理應(yīng)激對人子宮肌瘤細胞增殖及ER、PR表達的影響.pdf

1、目的：
　　本課題以國家自然科學基金資助項目（編號：81072838）為依托進行設(shè)計。在中醫(yī)學“情志學說”理論基礎(chǔ)上，結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學“心理應(yīng)激理論”，基于課題組前期應(yīng)用去甲腎上腺素（Norepinephrine，NE）、腎上腺素（Epinephrine，E）、異丙腎上腺素（Isoproterenol，ISO）作用于體外培養(yǎng)的人子宮肌瘤（Uterine leiomyomas，ULM）平滑肌細胞，證實神經(jīng)遞質(zhì)與ULM細胞增殖、雌激素受體

2、（Estrogen receptor，ER）和孕激素受體（Progesterone receptor，PR）表達有明顯相關(guān)性的基礎(chǔ)上，進一步研究NE及其拮抗劑酚妥拉明對ULM細胞體外生長的影響。探討肝郁－心理應(yīng)激通過激活腎上腺素能受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響ULM細胞體外增殖及ER、PR蛋白表達的機制，揭示肝郁－心理應(yīng)激在子宮肌瘤發(fā)病中的作用，為臨床從肝郁－心理應(yīng)激角度防治ULM提供新的思路和方法，并為中醫(yī)學“情志學說”提供新的理論依據(jù)。

3、>　　方法：
　　以人子宮肌瘤組織（經(jīng)病理檢查證實）為材料，應(yīng)用膠原酶消化法，體外分離、培養(yǎng)獲得ULM細胞，經(jīng)HE及免疫細胞化學SABC法進行細胞學鑒定。將培養(yǎng)的ULM細胞分為三組：Α.對照組；B. NE組；C. NE+酚妥拉明組。B組添加NE1μmol/L，C組預(yù)先加酚妥拉明1μmol/L培養(yǎng)1h后加NE1μmol/L，三組細胞培養(yǎng)12h后收集。應(yīng)用MTT法檢測細胞增殖情況；采用競爭性酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）測定各組細胞E

4、R、PR蛋白的表達。
　　結(jié)果：
　　1．成功培養(yǎng)了人ULM平滑肌細胞，并通過了HE染色及免疫細胞化學鑒定。
　　2．NE及酚妥拉明對ULM細胞增殖的影響：
　　與對照組比較，NE組代表ULM細胞增殖情況的OD值明顯高于空白組，差異有顯著性(P<0.05)。NE+酚妥拉明組與 NE組比較，OD值低于NE組，差異無顯著性((P>0.05)。NE+酚妥拉明組與對照組比較，OD值高于對照組，差異有顯著性(P<0.05)

5、。
　　3．NE及酚妥拉明對ULM細胞ER表達的影響：
　　與對照組比較，NE組ULM細胞ER蛋白表達明顯高于對照組，差異有顯著性(P<0.05)。NE+酚妥拉明組與NE組比較，ULM細胞ER蛋白表達明顯低于NE組，差異有顯著性(P<0.05)。NE+酚妥拉明組與對照組比較,ER蛋白表達明顯低于對照組，差異有顯著性(P<0.05)。
　　4．NE及酚妥拉明對ULM細胞PR表達的影響：
　　與對照組比較，NE組UL

6、M細胞PR蛋白表達明顯高于對照組，差異有顯著性(P<0.05)。NE+酚妥拉明組與NE組比較，ULM細胞PR蛋白表達明顯低于NE組，差異有顯著性(P<0.05)。NE+酚妥拉明組與對照組比較，ULM細胞PR蛋白表達高于對照組，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.NE具有促進ULM細胞增殖的作用。
　　2.NE具有促進ULM細胞ER、PR蛋白表達的作用，而酚妥拉明抑制ULM細胞ER、PR蛋白的表達。<