2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、桿狀病毒是一類基因組為雙鏈環(huán)狀的DNA病毒,其主要感染節(jié)肢動物特別是鱗翅目,雙翅目和膜翅目昆蟲的一類病毒。桿狀病毒科分為核型多角體病毒屬(NPV)和顆粒體病毒屬(GV)?,F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)的桿狀病毒以NPV為主,核型多角體病毒根據(jù)病毒粒子中所含核衣殼數(shù)量的多少,從形態(tài)學(xué)上可分為單粒包埋型和多粒包埋型。桿狀病毒是調(diào)節(jié)昆蟲種群密度的重要病原因子,它作為一種生物殺蟲劑,具有病原特異性較高、安全性好、害蟲不易產(chǎn)生抗性,且能在田間長期控制害蟲種群等諸多優(yōu)點

2、而成為生物防治研究中的熱點,具有廣闊的應(yīng)用前景。茶毛蟲(EuproctispseudoconspersaStrand)是茶樹上的主要害蟲之一,茶毛蟲核型多角體病毒對茶毛蟲具有高的致病性,已在大田中批量用于防治茶毛蟲。本文選擇茶毛蟲核型多角體病毒的多角體蛋白基因(polyhedringene)進(jìn)行表達(dá),利用表達(dá)產(chǎn)物制備其抗體,并將抗體應(yīng)用于定量檢測茶毛蟲病毒,為茶毛蟲核型多角體病毒農(nóng)藥檢測提供一種方法,也為其它桿狀病毒定量檢測探索一條途徑

3、。結(jié)果研究如下: 1.采用生物測定法測定了茶毛蟲病毒對茶毛蟲2齡幼蟲的毒力,幼蟲死亡率(y)對濃度的對數(shù)值(x)毒力回歸曲線方程為:y=1.3952x-1.7737,相關(guān)系數(shù)r=0.9975(p<0.01)。 2.以EupsNPV基因組DNA為模板,PCR擴(kuò)增出全長為741bp的ph基因編碼區(qū)片段。將Ep-ph編碼區(qū)插入pET-28-a表達(dá)載體中,構(gòu)建了原核表達(dá)載體pET-28-a-Ep-ph,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE

4、3),在IPTG誘導(dǎo)下進(jìn)行了高效的表達(dá)。采用傳統(tǒng)的割膠方法純化目的融合蛋白作為抗原,免疫新西蘭大白兔,制備了EupsNPV的ph抗體,測得的抗體效價為6.4×104。 3.對多克隆抗體的特異性進(jìn)行Westernblotting檢測,表明制得的抗體特異性良好。間接ELISA檢測茶毛蟲病毒樣品并繪制了標(biāo)準(zhǔn)曲線,OD495值(y)對病毒濃度的對數(shù)值(x)的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:y=0.4152x-0.8229,相關(guān)系數(shù)r=0.9897(p<

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