B、C基因型乙肝病毒在HEK-293T細胞中免疫炎癥反應(yīng)比較研究.pdf

1、目的：
　　通過觀察比較B、C基因型乙肝病毒感染HEK-293T細胞后分泌細胞因子產(chǎn)生的免疫炎癥反應(yīng)差異，作為B和C基因型乙肝病毒和臨床病情是否相關(guān)的參考，從而對乙肝基因型與臨床相關(guān)性的發(fā)生機制作補充，為臨床治療提供方向。
　　方法：
　　隨機選取2015年1月至2015年9月至南昌市第九醫(yī)院門診和住院就診的慢性乙型肝炎患者（HBV-DNA均為陽性）的血清標(biāo)本254例。性別、年齡不限。并排除其他合并的疾病，且未進行性抗

2、病毒治療。診斷符合2015年中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會，中華醫(yī)學(xué)會感染病學(xué)分會聯(lián)合制訂的慢性乙型肝炎防治指南。采用多對型特異性引物巢式PCR法鑒定并篩選出血清標(biāo)本中的B、C兩種基因型，隨機選取B、C基因型15例。分別擴增B、C基因型血清標(biāo)本中HBV病毒的s和c基因片段。采用克隆技術(shù)構(gòu)建含有s和c基因片段表達綠色熒光蛋白的重組真核表達質(zhì)粒，轉(zhuǎn)染至HEK-293T細胞中，檢測該細胞中IL-1β、TNF-α等的細胞因子分泌的水平。分析各組間的臨床特

3、征、IL-1β、TNF-α水平的差異。采用SPSS20.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析。P＜0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　轉(zhuǎn)染B基因型的s片段細胞中IL-1β水平為（143.89±46.48）pg/ml、TNF-α水平為（7.97±1.03）pg/ml，c片段細胞中IL-1β水平為（253.62±65.12）pg/ml、TFN-α水平為（8.65±1.07）pg/ml；C基因型的s片段中IL-1β水平為（40.96±29.

4、29）pg/ml，TNF-α水平為（4.22±0.56）pg/ml，c片段中IL-1β水平為（35.78±19.31）pg/ml，TNF-α水平為（3.39±0.33）pg/ml。
　　結(jié)論：
　　乙肝病毒B基因型中基因片段在體外HEK-293T中的免疫炎癥介質(zhì)表達量明顯高于C基因型。這或許是一個與臨床致病性不同有關(guān)的因素。能從某種程度上證實兩種基因型在體外細胞免疫反應(yīng)過程中的不同。這為我們提供了另一個慢性乙型肝炎的研究角度