門(mén)靜脈高壓癥中Apelin-APJ信號(hào)通路的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究apelin/APJ信號(hào)通路在門(mén)靜脈高壓癥大鼠腸系膜組織及肝臟組織中的狀態(tài)，探索apelin/APJ信號(hào)通路的活化在門(mén)靜脈高壓癥肝纖維化過(guò)程中的作用，以及是否參與血管新生和重塑這一病程演進(jìn)，為后續(xù)深入研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：實(shí)驗(yàn)按照動(dòng)物倫理要求應(yīng)用經(jīng)典方法，對(duì)大鼠采用部分門(mén)靜脈結(jié)扎術(shù)(partial portal vein ligation，PPVL)及膽道結(jié)扎離斷術(shù)(bile duct ligation，BDL)

2、兩種方法，制備類似肝前性門(mén)靜脈高壓癥和肝內(nèi)門(mén)靜脈高壓癥的大鼠模型，以期從不同分型加以研究。通過(guò)動(dòng)物大體觀察、血流動(dòng)力學(xué)測(cè)量門(mén)靜脈壓力的改變，對(duì)腸系膜組織和肝臟組織做形態(tài)學(xué)、免疫組織化學(xué)檢測(cè)，并運(yùn)用realtime-PCR及Western Blot技術(shù)從基因和蛋白層面檢測(cè)組織內(nèi) apelin/APJ信號(hào)及相關(guān)下游生物分子的表達(dá)情況，判斷apelin/APJ信號(hào)在腸系膜和肝臟中的激活狀態(tài)。
　　結(jié)果：兩種門(mén)脈高壓模型組大鼠建模成功后，

3、其游離門(mén)靜脈壓力均比相應(yīng)對(duì)照組高。膽道結(jié)扎離斷模型大鼠肝纖維化明顯，而部分門(mén)靜脈結(jié)扎模型則并無(wú)明顯肝纖維化。組織學(xué)檢查證實(shí)兩種門(mén)脈高壓模型組大鼠腸系膜血管新生明顯，且側(cè)支循環(huán)大量開(kāi)放。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示APJ在兩模型組腸系膜均有過(guò)量表達(dá)，在BDL組肝臟有表達(dá)。realtime-PCR及Western Blot證實(shí)apelin和APJ在兩模型組腸系膜組織均有增高。apelin和APJ在BDL組肝臟組織有增高，而在PPVL組肝臟則無(wú)差異。