鹽酸奈必洛爾-羥丙基-β-環(huán)糊精包合物及其口腔黏附片的研究.pdf

1、目的：
　　鹽酸奈必洛爾（Nebivolol hydrochloride，NBH）作為美國Johnson and Johnson公司研發(fā)的新型第三代β-受體阻滯劑，主要用于輕、中度高血壓的治療，也可用于充血性心衰和心絞痛等病癥[1]。NBH不僅對β1受體選擇性強，而且還能夠通過精氨酸-NO通道的調節(jié)而發(fā)揮擴血管的作用。目前，鹽酸奈必洛爾已上市的劑型為普通片劑，部分患者口服時生物利用度較低，對于強代謝型患者，其生物利用度僅為12％[

2、2]，可能與其肝臟首過效應及溶解度差有關。為提高鹽酸奈必洛爾的生物利用度，本課題在采用環(huán)糊精包合技術改善藥物水溶性的基礎上，通過研制新型口腔黏膜給藥緩釋制劑—口腔黏附雙層片，以期避開肝臟的首過作用，延緩藥物在口腔黏膜的滯留時間，提高生物利用度，減少個體差異。方法：
　?。?）鹽酸奈必洛爾處方前研究：采用 HPLC法測定鹽酸奈必洛爾溶液的含量，采用飽和水溶液法測定鹽酸奈必洛爾在純水、0.1mol·L-1鹽酸溶液及 pH2.0、pH6

3、.8、pH7.4、pH8.0磷酸鹽緩沖液中的平衡溶解度；通過搖瓶法測定鹽酸奈必洛爾在正辛醇-水/緩沖液體系中的表觀油水分配系數(shù)（Log P）；通過原料藥的影響因素實驗，考察了鹽酸奈必洛爾的吸濕性以及供試品在高溫（60℃）、高濕（RH=75%±5）、強光（4500lx±500）破壞條件下的穩(wěn)定性。
　?。?）鹽酸奈必洛爾-HP-β-CD包合物的制備與表征：以溶液攪拌-冷凍干燥法制備包合物；采用 L9(34)正交實驗設計,以鹽酸奈必洛

4、爾-HP-β-CD投料比（摩爾比）、包合溫度、包合時間、乙醇濃度為考察因素，以包封率為指標篩選最佳工藝；通過相溶解度法、紅外吸收光譜法、X-射線粉末衍射法、核磁共振法對包合物進行驗證；運用HPLC方法測定鹽酸奈必洛爾-HP-β-CD包合物的包封率和載藥量。最后，運用飽和水溶液法分別測定鹽酸奈必洛爾和包合物在純水、pH6.8磷酸鹽緩沖液中的溶解度，以考察包合物的增溶性能。
　?。?）包合物口腔黏附雙層片的制備和處方優(yōu)化：本研究采用粉

5、末直接壓片法制備內層片，為減少異物感對患者帶來的不適，擬將其制成直徑為6mm，片重約為60mg的口腔黏附雙層片。首先通過單因素實驗，以黏附劑的種類、黏附劑的用量和比例以及黏膜促滲劑的用量為考察對象，以體外黏附力、體外累計釋放度和體外溶脹率為考察指標，篩選內層片處方。然后根據(jù)單因素實驗結果，確定黏附劑種類，并選擇對黏附力和釋放度影響較大的兩個因素，每個因素設置5個水平，采用中心組合設計-效應面法安排實驗，優(yōu)化處方工藝。
　　（4）包

6、合物口腔黏附雙層片的質量評價：建立 HPLC法作為本制劑的含量測定方法，并進行系列方法學驗證。依據(jù)《中國藥典》四部制劑通則（2015版），分別對本品性狀和含量均勻度進行藥劑學表征；根據(jù)力矩平衡原理，采用自制裝置對口腔黏附片的體外黏附力進行測定；運用紫外分光光度法建立體外釋放度測定方法，并對其釋藥曲線進行零級、一級、Higuich、Ritger-Peppas方程擬合，以擬合優(yōu)度最大，確定最佳擬合模型，推測其釋藥特性。
　　結果：

7、r>　?。?）通過對鹽酸奈必洛爾進行處方前研究，結果表明:在37±0.5℃下，鹽酸奈必洛爾在純水中和0.1mol·L-1鹽酸的平衡溶解度分別為722.53μg·mL-1和56.07μg·mL-1，在正辛醇-水/鹽酸體系中的油水分配系數(shù)分別為1.17和1.32。鹽酸奈必洛爾的平衡溶解度和油水分配系數(shù)對pH變化呈現(xiàn)出依賴性。在pH2.0～pH7.4的范圍內，隨著pH的升高， NBH的平衡溶解度降低，表觀油水分配系數(shù)增加；而當pH從7.4增加

8、至8.0時，平衡溶解度增加，油水分配系數(shù)降低；鹽酸奈必洛爾在相對濕度75%±5的條件下，其平均增重百分率為2.67%，根據(jù)“引濕性特征與引濕性增重”的界定，NBH屬于有引濕性的藥物；影響因素實驗結果表明，鹽酸奈必洛爾在高溫條件下較穩(wěn)定，強光和高濕條件下，藥物含量有所降低，有關物質基本無變化，提示鹽酸奈必洛爾原料藥及其制劑在生產(chǎn)、運輸和貯存過程中，應陰涼、干燥處保存，以保證藥物的安全、穩(wěn)定、有效。
　?。?）鹽酸奈必洛爾-HP-β-

9、CD最佳包合工藝為：主客分子投料比（摩爾比）1:1，包合溫度40℃，磁力攪拌時間4h，乙醇濃度80%；包合物驗證結果表明，鹽酸奈必洛爾、物理混合物與包合物的圖譜之間存在顯著差別，鹽酸奈必洛爾-HP-β-CD包合物形成，相溶解度圖呈AL型，且包合比為1:1；包合物經(jīng)HPLC測定后，包封率為（73.69±0.10）%，載藥量為（16.70±0.22）%，與理論值基本吻合，工藝重現(xiàn)性良好；鹽酸奈必洛爾和包合物增溶效應研究結果表明，藥物經(jīng)包合后

10、，其溶解度在純水和pH6.8磷酸鹽緩沖液中分別增大了3.18倍和11.10倍。
　　（3）由單因素實驗結果可知，選擇黏附力較大、膨脹率適中的CP和HPMC聯(lián)合作為生物黏附材料，以CP和HPMC總量為A因素，CP和HPMC比例為B因素，各因素的取值范圍分別為：5%~25%和0.20:1~1:1，進行效應面法優(yōu)化。最終，優(yōu)化得到的內層片處方為：包合物占處方總量的50%（相當于鹽酸奈必洛爾5mg），CP和HPMC占處方總量的11.45%

11、，二者比例為0.32:1，填充劑甘露醇占處方總量的37.15%，硬脂酸鎂和微粉硅膠分別占處方總量的0.8%和0.6%，保護層一側涂以10%的乙基纖維素乙醇溶液，自然干燥后即得。
　?。?）對自制的包合物口腔黏附片進行相關藥劑學評價，結果如下：本品為內層白色或類白色，外層一側覆透明薄膜，表面光滑的雙層片。含量均勻度結果表明，A+1.80S均小于15.0，符合藥典的規(guī)定。三批樣品的黏附力適中，符合口腔黏附制劑的規(guī)定。本制劑在8h內的釋

12、藥曲線與 Ritger-Peppas方程具有最佳擬合度， LnQ=0.5649lnt-1.3442， R2=0.9776，推測其釋放機制為non-fick擴散，即藥物釋放是由于藥物擴散和骨架溶蝕的共同作用。方法學驗證結果表明，用高效液相法作為本品含量測定方法，精密度、回收率高，線性、穩(wěn)定性好，快速、簡便的優(yōu)點。
　　結論：
　　本研究應用溶液攪拌-冷凍干燥法制備包合物，工藝先進，合理可行，制備的包合物包封率高，既解決了鹽酸奈

13、必洛爾的溶解度問題，又得到了性狀疏松的固體粉末，可為進一步研究打下基礎。
　　以包合物為壓片主藥，CP和 HPMC聯(lián)合作為生物黏附材料，采用直接壓片法制備用于口腔黏膜給藥的鹽酸奈必洛爾雙層片，制備工藝簡便、可行，可以滿足單向釋藥的要求。藥物經(jīng)口腔黏膜給藥，既可避免胃腸液中酶、酸的影響及肝首過效應，又能提高藥物的生物利用度，可為為鹽酸奈必洛爾新劑型的研究開發(fā)提供有益參考。
　　通過系列方法學驗證表明 HPLC法作為本品的含量測