阿霉素載藥小分子水凝膠的制備及體外抗腫瘤活性研究.pdf

1、目的和內(nèi)容：
　　阿霉素是一種廣譜抗癌藥物，廣泛應(yīng)用于肝癌、乳腺癌、胃癌等腫瘤的治療。為提高阿霉素溶解性，減少對(duì)心臟的毒副作用，聚合物膠束、聚合物納米粒、微球及脂質(zhì)體等納米載體的應(yīng)用得到廣泛研究，但這些載體在一定程度上都存在制備困難，包裹率低等問(wèn)題。在細(xì)胞三維培養(yǎng)、藥物控釋以及再生醫(yī)學(xué)等方面具有極大潛在應(yīng)用前景的小分子多肽水凝膠的出現(xiàn)為解決上述問(wèn)題帶來(lái)了新的希望。本論文旨在通過(guò)制備阿霉素載藥小分子水凝膠來(lái)提高阿霉素的溶解性和包載率

2、，從而進(jìn)一步提高阿霉素對(duì)多種腫瘤細(xì)胞的抗癌活性，使其作為一種新的抗癌藥物傳輸體系得到廣泛應(yīng)用。
　　方法：
　　1.小分子多肽的合成和表征：采用多肽固相合成法合成帶負(fù)電荷的小分子多肽：NapGFFYGRGD；通過(guò)反相高效液相色譜（RP-HPLC）分離純化小分子多肽；運(yùn)用液相色譜-質(zhì)譜連用和核磁分析手段確定小分子多肽的結(jié)構(gòu)。
　　2.阿霉素載藥小分子水凝膠的制備和表征：通過(guò)加熱-冷卻法制備阿霉素載藥小分子水凝膠；采用流變

3、學(xué)實(shí)驗(yàn)研究了不同當(dāng)量的阿霉素對(duì)阿霉素載藥小分子水凝膠力學(xué)強(qiáng)度的影響；用透射電鏡研究了含不同當(dāng)量阿霉素載藥小分子水凝膠的內(nèi)部微觀納米形貌；Zeta電位實(shí)驗(yàn)研究了阿霉素含量對(duì)小分子多肽納米纖維電位的影響；體外藥物釋放實(shí)驗(yàn)研究了不同力學(xué)強(qiáng)度水凝膠對(duì)阿霉素釋放速率的影響。
　　3.阿霉素載藥小分子多肽納米纖維的體外抗癌活性研究：運(yùn)用MTT實(shí)驗(yàn)研究阿霉素載藥小分子水凝膠納米纖維體系、游離阿霉素以及小分子多肽對(duì)胰腺癌(Pac-2)、宮頸癌(H

4、ela)以及肝癌(MCF-7)的細(xì)胞毒性效果。
　　結(jié)果：
　　1.采用多肽固相合成法得到的小分子多肽NapGFFYGRGD的粗產(chǎn)品產(chǎn)率達(dá)90％,反相高效液相色譜（RP-HPLC）分離純化后，小分子多肽純度達(dá)95%以上。
　　2.通過(guò)加熱-冷卻得到了含不同當(dāng)量阿霉素的阿霉素載藥小分子水凝膠；流變實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：在一定范圍內(nèi)，加入的阿霉素越多，阿霉素載藥小分子水凝膠的力學(xué)強(qiáng)度越強(qiáng)；透射電鏡結(jié)果表明，在凝膠化發(fā)生過(guò)程中，阿霉

5、素分子間聚集形成了納米球并分布在小分子多肽纖維表面作為交聯(lián)劑導(dǎo)致了凝膠化的發(fā)生；zeta電位實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：加入的阿霉素越多，小分子多肽納米纖維帶有的負(fù)電荷越少；體外藥物釋放實(shí)驗(yàn)表明，阿霉素載藥小分子水凝膠的形成有效避免了阿霉素的突釋，其釋放速率與凝膠力學(xué)強(qiáng)度成反比，即凝膠越弱阿霉素釋放越快。
　　3. MTT實(shí)驗(yàn)表明：與游離阿霉素相比，阿霉素載藥小分子多肽納米纖維體系增強(qiáng)了阿霉素對(duì)肝癌、宮頸癌以及胰腺癌的細(xì)胞毒性作用，尤其是胰腺癌