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文檔簡介
1、血鏈球菌(Streptococcus sanguis,S.sanguis)是最早定居牙面的口腔常駐細(xì)菌之一,在牙菌斑形成的早期階段及菌群平衡中起著重要作用,其與變形鏈球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)之間的相互競爭與拮抗在菌斑形成和發(fā)展中具有重要意義。S.sanguis的拮抗機制在于其產(chǎn)生的過氧化氫發(fā)揮的非特異性抑菌作用。碳水化合物的不同可影響細(xì)菌的代謝,其中蔗糖具有較強的致齲能力,木糖醇則不利于致齲性能
2、的發(fā)揮,蔗糖與木糖醇的應(yīng)用對S.sanguis的生長、產(chǎn)酸及產(chǎn)生過氧化氫的能力有何影響,以及其進一步影響血鏈球菌與變形鏈球菌相互作用的結(jié)果尚不明確。本實驗假設(shè)不同濃度的蔗糖與木糖醇可以影響血鏈球菌產(chǎn)生過氧化氫的能力并進一步影響血鏈球菌與變形鏈球菌的相互作用。
目的:
1.研究不同濃度蔗糖及木糖醇對S.sanguis、S.mutans生長、產(chǎn)酸的影響;
2.研究不同濃度蔗糖及木糖醇對S.sanguis產(chǎn)生過氧
3、化氫的能力影響;
3.了解不同濃度的過氧化氫對S.mutans生長的抑制作用;
4.進一步研究在不同濃度蔗糖及木糖醇培養(yǎng)基中S.sanguis與S.mutans相互作用的不同。
方法:
1.選用S.sanguis ATCC10556,S.mutans UA159為實驗菌株,運用比濁法測定不同濃度蔗糖及木糖醇對 S.sanguis、S.mutans生長的影響;使用 pH計測定培養(yǎng)物的pH值,記錄并計
4、算ΔpH,測定不同濃度蔗糖及木糖醇對S.sanguis、S.mutans產(chǎn)酸的影響;
2.運用鄰聯(lián)茴香胺-辣根過氧化物酶法測定有氧環(huán)境中不同濃度蔗糖及木糖醇對S.sanguis產(chǎn)生過氧化氫的量;
3.運用比濁法測定不同濃度過氧化氫對S.mutans生長的影響;
4.通過平板培養(yǎng)法觀察有氧、厭氧環(huán)境中不同濃度蔗糖及木糖醇對S.sanguis與S.mutans相互作用的影響。
結(jié)果:
1.S
5、.sanguis與S.mutans在有氧、厭氧環(huán)境中均能良好生長,其中生長能力BHI+50mmol/L蔗糖>BHI+5mmol/L蔗糖>BHI>BHI+5mmol/L木糖醇>BHI+50mmol/L木糖醇; S.mutans,S.sanguis培養(yǎng)上清液 pH值隨著培養(yǎng)時間的增加而減小,細(xì)菌的生長和代謝產(chǎn)酸存在一致性,細(xì)菌生長狀況越好、上清液pH值越小、代謝產(chǎn)酸越多。
2.在有氧環(huán)境中,S.sanguis在5組培養(yǎng)基中培養(yǎng)6h
6、累積產(chǎn)生的過氧化氫的量 BHI+50mmol/L蔗糖>BHI+5mmol/L蔗糖>BHI>BHI+5mmol/L木糖醇>BHI+50mmol/L木糖醇(P<0.05)。以6h時菌懸液600nm處的吸光度值標(biāo)準(zhǔn)化之后,BHI>BHI+5mmol/L蔗糖>BHI+50mmol/L蔗糖>BHI+5mmol/L木糖醇>BHI+50mmol/L木糖醇(P<0.05)。
3.0.05mmol/L的過氧化氫即可對S.mutans的生長產(chǎn)生輕
7、微抑制作用,且隨著過氧化氫濃度的逐漸增高抑制作用逐漸增強,其中在含1.5mmol/L過氧化氫的培養(yǎng)基中,細(xì)菌的生長幾乎完全被抑制。
4.同時接種兩種細(xì)菌有氧、厭氧環(huán)境均未觀察到相互抑制的作用。先接種S.mutans,對 S.sanguis的抑制作用在50mmol/L蔗糖中最為明顯,同種培養(yǎng)基中厭氧條件下的抑制作用強于有氧條件。先接種S.sanguis,對S.mutans的抑制作用在50mmol/L蔗糖中最為明顯,同種培養(yǎng)基中有
8、氧條件下的抑制作用強于厭氧條件。
結(jié)論:
不同濃度的蔗糖及木糖醇可以影響細(xì)菌的生長、產(chǎn)酸;S.sanguis在不同濃度的蔗糖及木糖醇培養(yǎng)基中產(chǎn)生過氧化氫的能力不同;不同濃度的過氧化氫對S.mutans生長的抑制作用不同;S.sanguis與S.mutans的相互作用亦受到糖的種類、濃度及環(huán)境中氧的影響,在有氧、50mmol/L蔗糖條件下 S.sanguis抑制S.mutans的能力最強,在厭氧、50mmol/L蔗糖條
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