細(xì)菌GYZC02株抗血栓活性成分研究.pdf

1、血栓性疾病嚴(yán)重危害人們的健康和生命，已成為人類疾病死亡的主要原因。發(fā)現(xiàn)新的抗血栓藥物，對預(yù)防和治療血栓性疾病具有重要意義。微生物是抗血栓藥物的重要來源之一。
　　本文通過豬血粉平板初篩，搖瓶復(fù)篩，從貴陽市周邊的土壤中分離篩選到一株具有抗血栓活性的菌株GYZC02。通過生理生化試驗(yàn)和16S rDNA基因序列分析對GYZC02菌株進(jìn)行了鑒定，結(jié)果顯示GYZC02菌株的大部分特征與枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis)基本一

2、致，將該菌16S rDNA序列與NCBI網(wǎng)站數(shù)據(jù)庫進(jìn)行同源性比對，利用MEGA5.0繪制系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹，相似度表明菌株GYZC02與Bacillus subtilis BL10的16S rDNA序列同源性達(dá)到100％，結(jié)合生理生化試驗(yàn)和16S rDNA基因序列分析結(jié)果，菌株GYZC02被鑒定為枯草芽孢桿菌。
　　采取單因素試驗(yàn)對菌株GYZC02進(jìn)行液體發(fā)酵條件優(yōu)化，優(yōu)化后最佳培養(yǎng)基成分是：可溶性淀粉1.5%，酵母膏0.7%，KH2

3、PO40.3%，Na2HPO40.2%， CaCl20.02%，MgSO40.03%，F(xiàn)eSO40.04%；最佳發(fā)酵工藝條件是：發(fā)酵溫度37℃，初始pH7.0，接種量4%，裝液量75 mL/250 ml，搖床速度170 r/min，接種齡12h，發(fā)酵時(shí)間48h。此時(shí)抗血栓活性物的活力最高。
　　通過乙酸乙酯萃取和酸沉淀法分離提取得到抗栓活性物質(zhì)粗品，將該物質(zhì)進(jìn)行體外抗血栓、小鼠體內(nèi)抗血栓試驗(yàn)和抗血小板凝集試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：GYZC0