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文檔簡介
1、目的:
探討攜人血栓調(diào)節(jié)蛋白(human thrombomodulin,hTM)基因的內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells,EPCs)局部移植預(yù)防動脈成形術(shù)后再狹窄的可行性。
方法:
應(yīng)用密度梯度離心法分離兔外周血EPCs;慢病毒載體plenti6.3-hTM-IRES-EGFP感染EPCs,并以超順磁性氧化鐵納米顆粒標(biāo)記;利用雙腔Fogarty球囊制作兔右側(cè)頸總動脈損傷模型
2、共36只(隨機(jī)平均分為三組),利用Fogarty球囊組斷損傷段近心端血流后、分別將hTM-EPCs、單純EPCs或等量生理鹽水定向移植至血管損傷處;術(shù)后1周每組隨機(jī)選取4只兔取損傷血管段行Western blot檢測及普魯士藍(lán)染色,觀察血管損傷處有無外源性EPCs定植;術(shù)后4、8周行MR掃描,評估血管腔狹窄程度;術(shù)后8周末取所有剩余兔損傷血管段行HE、彈力纖維及PCNA染色,觀察損傷段血管壁結(jié)構(gòu)、平滑肌及內(nèi)膜增生程度。
結(jié)果:
3、
術(shù)后1周,普魯士藍(lán)染色顯示損傷處血管內(nèi)膜有外源性含鐵EPCs附著;Westernblot檢測示hTM-EPCs組損傷血管段高表達(dá)血栓調(diào)節(jié)蛋白(thrombomodulin,TM)。MR顯示hTM-EPCs組損傷血管段管腔狹窄程度低于單純EPCs組及對照組。HE、彈力纖維及PCNA染色結(jié)果顯示,術(shù)后8周,hTM-EPCs組、單純EPCs組及對照組內(nèi)膜/中膜比(N/M)分別為0.35±0.04、0.70±0.06和1.30±0.
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