復合益生菌對順鉑誘發(fā)大鼠黏膜炎及5-HT水平異常的影響.pdf

1、目的:
　　1.探討順鉑所引起的腸道菌群紊亂及其與腸黏膜炎和5-羥色胺(5-HT)水平異常的關系。
　　2.分析使用復合益生菌DM#1號調(diào)節(jié)順鉑所引起的腸道菌群紊亂，進而改善腸黏膜炎及5-HT水平異常。
　　方法:
　　1.利用6mg/kg順鉑一次性注射建立大鼠腸粘膜炎及5-HT水平異常的模型。
　　2.實驗分組:空白組，模型組，益生菌組（包括短雙歧桿菌，嗜酸乳桿菌，鼠李糖乳桿菌，嗜熱鏈球菌），每組大鼠各1

2、4只。
　　3.使用喂食高嶺土方法探討大鼠有無異食癖行為。
　　4.對大鼠結腸組織進行HE染色，并進行病理學評分，觀察腸組織損傷情況。
　　5.使用PCR-DGGE方法及RT-PCR方法鑒定大鼠腸道菌群變化特點。
　　6.ELISA方法檢測各組大鼠局部腸組織中炎癥因子TNF-α，IL-6水平和抗炎因子IL-10水平的變化。
　　7.免疫熒光檢測法檢測各組大鼠腸組織中嗜鉻粒蛋白A及其所分泌的5-HT的數(shù)量。<

3、br>　　8.ELISA方法檢測各組大鼠血清和結腸組織中5-HT的變化。
　　結果:
　　1.順鉑處理后，模型組大鼠體重明顯減輕(P＜0.05)，順鉑處理后第3天，模型組大鼠結腸組織有明顯嚴重病變，病理學評分增高，炎癥因子TNF-α，IL-6水平升高和抗炎因子IL-10水平降低;處理后第6天結腸損傷仍然嚴重，炎癥因子TNF-α，IL-6水平同樣處于較高水平，抗炎因子IL-10水平也未有明顯恢復。益生菌組大鼠，順鉑處理后第3天

4、，較同一時期模型組大鼠結腸組織病變減輕，炎癥因子TNF-α，IL-6水平有顯著降低(P＜0.05)和抗炎因子IL-10水平顯著升高(P＜0.05)，順鉑處理后第6天，益生菌組炎癥反應較少，更接近于空白組水平。
　　2.順鉑處理后第3天，模型組大鼠腸道菌群多樣性降低，處理后第6天，腸道菌群有明顯紊亂。與同一時期模型組大鼠比較，順鉑處理后第3天，益生菌組大鼠腸道菌群多樣性較高。順鉑處理后第6天，腸道菌群無明顯紊亂，更接近于空白組水平，

5、與順鉑組相比腸道菌群有顯著差異。
　　3.順鉑處理后，模型組大鼠腸道菌群中乳桿菌屬，雙歧桿菌屬顯著降低，Clostridium cluster Ⅳ,Clostridium cluster ⅩⅣ顯著增加。而益生菌組大鼠乳桿菌屬，雙歧桿菌屬，Clostridium cluster Ⅳ,Clostridium cluster ⅩⅣ拷貝數(shù)水平更接近于空白組大鼠。
　　4.順鉑處理后第3天，模型組大鼠腸嗜鉻粒蛋白A及腸嗜鉻細胞所分泌的

6、5-HT水平升高最為明顯，異食癖現(xiàn)象也最為嚴重。處理后第6天，腸嗜鉻粒蛋白A及5-HT水平有所恢復，異食癖現(xiàn)象減輕。與同一時期模型組大鼠相比，益生菌大鼠，腸嗜鉻粒蛋白A及腸嗜鉻細胞所分泌的5-HT水平有明顯降低，異食癖現(xiàn)象有所減輕。
　　結論:
　　1.順鉑可導致腸道菌群紊亂，乳桿菌屬、雙歧桿菌屬降低;Clostridiumcluster Ⅳ, Clostridium cluster ⅩⅣ增加。
　　2.補充益生菌在維