臭氧水對(duì)兔膝骨性關(guān)節(jié)炎作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景：骨性關(guān)節(jié)炎(Osteoarthritis，OA)作為中老年人群中發(fā)病率較高的一種慢性、退行性疾病，最常累及膝關(guān)節(jié)，致殘率高，給患者帶來(lái)極大痛苦。其發(fā)病機(jī)制相當(dāng)復(fù)雜，由于機(jī)械性、生物性等多方面因素的影響，OA以關(guān)節(jié)軟骨的病變最為突出。而滑膜炎是OA諸多炎癥反應(yīng)的主要表現(xiàn)之一，可引起骨性關(guān)節(jié)炎早期的臨床癥狀，進(jìn)而影響關(guān)節(jié)軟骨的改變。目前針對(duì)膝骨性關(guān)節(jié)炎的治療方法多種多樣，臨床上主要應(yīng)用非阿片類消炎止痛藥或阿片類藥物緩解疼痛，關(guān)節(jié)腔

2、內(nèi)注射玻璃酸鈉或臭氧改善骨關(guān)節(jié)炎癥狀，手術(shù)治療用于晚期及嚴(yán)重疼痛的骨關(guān)節(jié)炎患者，其他各種治療方法，包括中醫(yī)療法也常被應(yīng)用于該疾病。盡管臨床上臭氧水用于膝骨性關(guān)節(jié)炎效果明確，但與其相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究未見(jiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)關(guān)節(jié)腔注射臭氧水對(duì)兔膝骨性關(guān)節(jié)炎模型進(jìn)行干預(yù)，對(duì)比實(shí)驗(yàn)動(dòng)物關(guān)節(jié)活動(dòng)度的變化，觀察關(guān)節(jié)軟骨及滑膜的病理變化，利用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物關(guān)節(jié)滑膜中IL-6、TNF-α和VEGF的含量，評(píng)價(jià)臭氧水對(duì)兔膝骨性關(guān)節(jié)炎的影響，對(duì)

3、其作用機(jī)制進(jìn)行探討。
　　目的：觀察臭氧水對(duì)兔膝關(guān)節(jié)軟骨和滑膜的作用，及對(duì)滑膜中 IL-6、TNF-α和VEGF的影響，分析臭氧水治療膝骨性關(guān)節(jié)炎的相關(guān)機(jī)制。
　　方法：
　　1.動(dòng)物模型建立與干預(yù)新西蘭兔32只，雌雄各半，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為4組,A組：空白對(duì)照組，B組：模型對(duì)照組，C組：臭氧水對(duì)照組，D組：臭氧水治療組，每組8只。A組不予任何處理；B組僅造兔骨關(guān)節(jié)炎模型；C組僅關(guān)節(jié)腔注射20μg/ml臭氧水2ml,

4、每周1次,共3次；D組造模成功后，臭氧水注射方法同C組。
　　2.軟骨和滑膜標(biāo)本 HE染色觀察軟骨和滑膜標(biāo)本制作成病理切片,分別在光鏡下觀察軟骨組織學(xué)形態(tài)以及滑膜組織有無(wú)細(xì)胞增生及組織變性、結(jié)構(gòu)是否完整、是否有炎性細(xì)胞浸入、有無(wú)細(xì)胞壞死。
　　3.ELISA法檢測(cè)兔膝關(guān)節(jié)滑膜中IL-6、TNF-α及VEGF在不同分組中表達(dá)含量有無(wú)差異。
　　4.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.

5、05，P≤0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度觀察 B、D組造模后關(guān)節(jié)活動(dòng)度均小于A組（P<0.05)；B組處死時(shí)與造模后比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；D組處死時(shí)較B組處死時(shí)關(guān)節(jié)活動(dòng)度大（P<0.05)；D組處死時(shí)較造模后關(guān)節(jié)活動(dòng)度增大（P<0.05)。
　　2.膝關(guān)節(jié)滑膜厚度觀察與A組相比，B、D組滑膜明顯更厚(P<0.05)；C組與A組差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；D組滑膜較B組薄(P<0.

6、05）。
　　3.軟骨和滑膜標(biāo)本HE染色觀察 A組軟骨表面完整，四層結(jié)構(gòu)清晰，細(xì)胞排列整齊，潮線完整；B組軟骨表面粗糙不規(guī)則，可見(jiàn)明顯裂隙，軟骨層變薄，細(xì)胞數(shù)量減少,排列紊亂；C組軟骨各層結(jié)構(gòu)清晰，軟骨細(xì)胞排列較整齊，軟骨纖維細(xì)胞未見(jiàn)增多；D組軟骨表面不規(guī)則缺損較B組為輕，軟骨細(xì)胞數(shù)量減少，散在分布，結(jié)構(gòu)排列尚整齊。A組滑膜組織未見(jiàn)充血水腫，滑膜細(xì)胞無(wú)增生現(xiàn)象，滑膜組織結(jié)構(gòu)正常；B組滑膜組織失去正常結(jié)構(gòu)，細(xì)胞增生明顯,炎性細(xì)胞浸潤(rùn)

7、嚴(yán)重,血管增生充血，滑膜厚度較A組顯著增加；C組滑膜無(wú)炎癥表現(xiàn)；D組滑膜組織炎癥細(xì)胞減少，充血水腫減輕，滑膜厚度較B組明顯降低。
　　4. ELISA法檢測(cè)結(jié)果與A組相比,C組滑膜組織IL-6、TNF-α和VEGF表達(dá)增高不明顯（P>0.05），B、D兩組滑膜組織IL-6、TNF-α和VEGF表達(dá)增高(P<0.05)；D組較B組滑膜中IL-6、TNF-α、VEGF表達(dá)降低(P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.關(guān)節(jié)腔注