刺五加關(guān)節(jié)腔注射干預(yù)兔膝骨性關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討刺五加關(guān)節(jié)腔注射治療原發(fā)性膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)制。 方法：進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，64只新西蘭白兔隨機(jī)分為4組(每組16只)，16只不造模作為正常組，其余48只用內(nèi)側(cè)半月板部分切除的方法造模，最后分為正常組、刺五加組、透明質(zhì)酸鈉組，模型組，正常組既不造模也不給藥，刺五加組給予刺五加注射液0.5ml/只術(shù)側(cè)關(guān)節(jié)腔注射，透明質(zhì)酸鈉組給予0.3ml/只術(shù)側(cè)關(guān)節(jié)腔注射，模型組只造模。術(shù)后2周開始用藥干預(yù)，直到處死前1周。分6周和10

2、周兩個(gè)時(shí)相點(diǎn)采集血清和關(guān)節(jié)液，測(cè)定血液和關(guān)節(jié)滑液中NO、iNOs、SOD、MDA水平。同樣，分兩個(gè)時(shí)相點(diǎn)處死動(dòng)物取材，肉眼觀察關(guān)節(jié)軟骨及滑膜，骨贅和軟骨潰瘍，拍膝關(guān)節(jié)X線片，觀察軟骨下骨的硬化情況。制備軟骨及滑膜石蠟切片HE及AB—PAS染色，對(duì)軟骨和滑膜分別在光鏡下進(jìn)行病理評(píng)分。用末端原位標(biāo)記檢測(cè)軟骨細(xì)胞凋亡狀況，免疫組化法檢測(cè)bcl-2在軟骨中的表達(dá)，并檢測(cè)尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)在滑膜上的表達(dá)。 結(jié)果：正常組關(guān)節(jié)面

3、光滑有光澤，軟骨透明，無(wú)明顯缺損和新生物，滑膜無(wú)充血。6周時(shí)，可見(jiàn)刺五加組和HA膝關(guān)節(jié)有輕度病變，模型組病變較前者稍重。10周時(shí)，模型組關(guān)節(jié)面不光滑，無(wú)光澤，軟骨不透明，有明顯缺損和新生物，滑膜色暗充血腫脹；刺五加組軟骨色澤較暗，可見(jiàn)潰瘍形成較表淺，透明度差，有少到中等量骨贅形成．透明質(zhì)酸鈉組關(guān)節(jié)面見(jiàn)潰瘍生成較表淺，滑膜腫脹，骨贅形成較多。隨時(shí)間增長(zhǎng)病變有加重的趨勢(shì)，病理學(xué)評(píng)分分值增高。X線檢查顯示手術(shù)3組動(dòng)物在6周時(shí)內(nèi)側(cè)關(guān)節(jié)間隙狹窄，

4、脛骨平臺(tái)軟骨下骨密度輕微增高，可有少許骨贅生成；10周時(shí)上述變化更加明顯。HE及AB—PAS染色可見(jiàn)：除正常組外，軟骨的完整性均不同程度的遭到破壞。AB—PAS不同程度的基質(zhì)失染，表示各手術(shù)造模組蛋白多糖有不同程度的丟失。還可見(jiàn)軟骨中不同程度的新生血管和纖維化變，其中以模型組最嚴(yán)重，且10周組較6周組病變嚴(yán)重。6周時(shí)模型組血清及滑液中的NO較正常組有明顯的升高(P＜0.05)，刺五加組和HA組的NO值無(wú)明顯升高(P＞0.05)，HA組和

5、模型組iNOs較正常組有所升高(P＜0.05)，刺五加組未見(jiàn)明顯變化(P＞0.05)，HA組iNOs較刺五加組上升明顯(P＜0.05)。各手術(shù)造模組的SOD較正常組都有明顯的降低(P＜0.05)，各手術(shù)造模組MDA較正常組有明顯增高。10周時(shí)各手術(shù)造模組的血清及關(guān)節(jié)滑液中的NO、iNOs、MDA水平較正常組有明顯的升高，以模型組升高最明顯(P＜0.05)。HA組NO水平較刺五加組上升明顯(P＜0.05)。各手術(shù)造模組的SOD水平較正常組

6、有明顯的降低(P＜0.05)，刺五加組SOD水平又高于HA組(P＜0.05)。HA組MDA和iNOS水平似乎略高于刺五加組，但是無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。6周與10周兩個(gè)時(shí)相點(diǎn)相比較，血清和關(guān)節(jié)滑液中的NO、iNOS及MDA水平有較明顯的上升趨勢(shì)(P＜0.05)，SOD水平有明顯的下降趨勢(shì)(P＜0.05)。兩個(gè)時(shí)相點(diǎn)，刺五加組和HA組的凋亡率低于模型組(P＜0.05)，bcl-2的表達(dá)高與模型組(P＜0.05)，刺五加組與HA組之間無(wú)差別(p＞0.

7、05)。在6周時(shí)，手術(shù)造模各組滑膜中uPA表達(dá)強(qiáng)于正常組(P＜0.05)，其中HA組和刺五加組的表達(dá)要弱于模型組(P＜0.05)。到10周時(shí)，HA組、刺五加組和正常組uPA表達(dá)較6周時(shí)未見(jiàn)明顯變化，只有模型組的可以見(jiàn)有增加趨勢(shì)但不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：刺五加注射液可以減緩實(shí)驗(yàn)性兔膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的病程進(jìn)展，其機(jī)理可能是： 1、刺五加注射液通過(guò)對(duì)滑膜與軟骨兩個(gè)途徑減緩關(guān)節(jié)退變。 2、刺五加有可能通過(guò)其活血化瘀，免