醋制對延胡索主要活性成分含量及藥效學(xué)影響研究.pdf

1、延胡索是中藥炮制醋制法的代表藥物，“醋制入肝經(jīng)”是炮制歸經(jīng)理論重要內(nèi)容之一。本文在延胡索炮制工藝規(guī)范化研究基礎(chǔ)上，對其醋制前后化學(xué)成分含量變化、藥效學(xué)指標(biāo)變化及主要成分代謝規(guī)律進(jìn)行研究，探討延胡索經(jīng)醋制后，對其入肝經(jīng)作用的影響。
　　首先通過正交試驗(yàn)法，優(yōu)選醋炙延胡索最佳炮制工藝。以輔料用量、炒制溫度、炒制時(shí)間及翻炒頻率為因素，以延胡索乙素、甲素等有效成分含量為指標(biāo)考察工藝。結(jié)果顯示：每100g延胡索用醋20ml，密閉浸潤30mi

2、n，在150℃~160℃溫度下，以每分鐘40次的頻率翻炒6min為最佳。以最佳工藝制備樣品，采用高效液相色譜法(HPLC法)對醋制前后其主要活性成分進(jìn)行含量測定。結(jié)果：醋制后延胡索乙素增長30.09％，延胡索甲素增長23.56%，黃連堿增長20.02%，總堿含量增長19.85%的結(jié)果，驗(yàn)證了醋制增加了延胡索藥效成分溶出，起到了增效的作用。
　　其次，以皮下注射腎上腺素模擬“暴怒”，以冰浴模擬“寒邪”侵襲建立的“氣滯血瘀證”急性血瘀

3、大鼠為模型，對給藥大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)進(jìn)行檢測。結(jié)果顯示：不同劑量的延胡索生品和醋品對血瘀證模型大鼠的血液流變學(xué)指標(biāo)有不同程度改善作用，且相同劑量下醋延胡索各項(xiàng)指標(biāo)改善作用強(qiáng)于生品；從全血粘度（200 s-1、50 s-1）、血沉方程K值、聚集指數(shù)、剛性指數(shù)幾個(gè)指標(biāo)看，相同劑量下醋品組較生品組有顯著性差異，醋延胡索化瘀作用較生延胡索作用強(qiáng)。證明醋制延胡索組對血瘀大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)有不同程度改善作用，能增強(qiáng)其活血化瘀的作用?；钛鏊幬锒嗳?/p>

4、肝經(jīng)[1]，以激發(fā)肝疏肝行氣，散瘀止痛作用，本實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了延胡索醋制引藥入肝經(jīng)，增強(qiáng)藥效。
　　再次，通過對肝臟內(nèi)的主要影響因子進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)延胡索生品和醋品對大鼠CYP450酶效應(yīng)的肝臟系數(shù)、肝微粒體蛋白含量及CYP450酶含量三個(gè)指標(biāo)，均有降低的作用，特別是醋品對CYP450酶含量抑制作用明顯。結(jié)果顯示：與健康組比較，高劑量的延胡索生品和醋品對大鼠CYP450酶效應(yīng)的肝臟系數(shù)、肝微粒體蛋白含量及CYP450酶含量均有顯著降低的作

5、用趨勢，特別是對CYP450酶含量有明顯的抑制作用，其中醋品影響更顯著。綜合分析，給藥組均可降低檢測指標(biāo)，特別是肝微粒體蛋白含量和C YP450含量的降低，表明其活性降低，提示延胡索對肝藥酶有酶抑制的趨向。推測延胡索醋制增效，可能與抑制肝藥酶的活性，減慢藥物的代謝，從而使其滯留時(shí)間延長有關(guān)。
　　最后，通過藥代動(dòng)力學(xué)方法，以高效液相色譜法(HPLC法)，檢測延胡索乙素單體灌胃的大鼠不同時(shí)間點(diǎn)所取血液中延胡索乙素的含量，繪制其血藥濃

6、度-時(shí)間曲線，結(jié)果發(fā)現(xiàn)延胡索乙素在0.75h左右達(dá)到最大濃度0.219μ g·ml-1，之后含量開始下降，并伴有未知成分的峰出現(xiàn)。通過液質(zhì)聯(lián)用分析，得知THP在體內(nèi)的物質(zhì)變化過程，結(jié)果表明入血主要成分為延胡索乙素原形，經(jīng)過一定時(shí)間后部分發(fā)生分解，經(jīng)推測，產(chǎn)生兩種可能產(chǎn)物，保留時(shí)間分別為2.28min(A)、17.31min(B)。經(jīng)初步解譜分析這兩種物質(zhì)均有過半碎片離子峰能夠與延胡索乙素相互吻合，認(rèn)為是THP經(jīng)代謝得到可能的代謝產(chǎn)物，通

7、過圖譜推斷產(chǎn)物A可能的結(jié)構(gòu)有兩種，即延胡索乙素分子結(jié)構(gòu)中11、12位被亞甲二氧基(-O-CH2-O-)取代，6位或者8位被甲氧基(-OCH3)取代。產(chǎn)物B在其四個(gè)可能的取代位（5位、6位、8位、13位）中，兩個(gè)位置被羧基(-COOH)、羧甲基(-OOCHCH3)取代，故有3×4=12種可能的結(jié)構(gòu)組成。此結(jié)果為延胡索乙素體內(nèi)轉(zhuǎn)化及延胡索醋制入肝經(jīng)提供了可能的物質(zhì)基礎(chǔ)研究依據(jù)。
　　綜上所述，本文通過以上四部分，采用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，對傳