馬、驢和騾成纖維細胞培養(yǎng)、核型及其G帶分析研究.pdf

1、分類號UDC學校代碼!Q12魚論文題目密級編號學號—3080—8023研究生：韭篚直指導教師：奎喜塑數(shù)援專業(yè)：動物堂研究方向：生墮生物堂區(qū)生物撞苤學院：生金科堂堂院二零一零年三月內蒙古大學碩士學位論文摘要本研究以馬、驢、騾為材料，利用體外培養(yǎng)技術構建了馬、驢、騾的成纖維體細胞系，然后采用常規(guī)染色體標本制作技術，制備、分析并比較了其染色體組型。在此基礎上嘗試了制備馬、驢、騾染色體G帶標本制備的最佳條件，并完成馬、驢、騾染色體G帶對比分析。

2、本研究為馬、驢、騾細胞遺傳學研究和疾病診斷提供技術基礎，同時為進一步闡明馬、驢的親緣關系及其種間雜交的生殖調控提供了基礎遺傳學資料。實驗結果如下：1成纖維體細胞系的構建：實驗結果說明常規(guī)的細胞系構建和培養(yǎng)方法宜適用于馬、驢和騾成纖維細胞，培養(yǎng)時所用培養(yǎng)液為DMEM，血清含量為10％，培養(yǎng)溫度為375。C，C02濃度為5％。傳代時用DPBS沖洗細胞，用O25％的胰蛋白酶／EDTA消化，傳代比例為1：3，3“4天更換培養(yǎng)液。2染色體標本及G

3、帶標本制作：通過常規(guī)染色體制備方法，可以制備出較好的馬、驢和騾染色體標本。本實驗將馬、驢、騾細胞在終濃度為O0671ag／ml秋水仙素的培養(yǎng)液中培養(yǎng)35h，0075mol／LKCl低滲處理32min，固定液以甲醇：冰醋酸以3：1體積比配置，預固定和固定時間分別為lmin、30min，固定2次。滴片后用終濃度為0076％的Giemsa染液染色處理10“～15min。本研究制備染色體G帶標本時總結出兩種較好的方法：標本老化法和直接顯帶法。標