苦丁茶皂苷降血脂作用的成分研究.pdf

1、苦丁茶（Ilex kudinchaC.J.Tseng）是冬青科冬青屬喬木植物的嫩葉，為藥食同源的常用中藥。為闡明苦丁茶皂苷降血脂的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，本論文以高脂血癥小鼠模型對(duì)其降血脂活性進(jìn)行了確證，同時(shí)利用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)初步闡明了苦丁茶皂苷降血脂的作用機(jī)理，并運(yùn)用超高效液相飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)對(duì)苦丁皂苷部位的化學(xué)成分進(jìn)行了全面的表征，為苦丁茶的開發(fā)和利用提供了新的科學(xué)依據(jù)。
　　方法：采用硅膠柱色譜層析、反相C18半制備等傳統(tǒng)的植

2、物化學(xué)分離模式，對(duì)苦丁茶皂苷成分進(jìn)行分離并進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)合QTOF-MS/MS對(duì)苦丁茶皂苷提取物中的所有皂苷成分進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征。通過高脂飼料建立高脂血癥小鼠模型，隨機(jī)4組，即苦丁茶皂苷TSL組（50 mg/kg）、苦丁茶皂苷TSH組（100 mg/kg）、P group（simvastaintablets20 mg/kg）、H group組，另取同步飼養(yǎng)的正常小鼠作為C group組，每組8只，連續(xù)灌胃給藥4周后，眼眶后靜脈叢取血，分離

3、血清，檢測(cè)所有小鼠血清中一系列生化血脂指標(biāo)變化；油紅O染色觀察肝臟組織病理形態(tài)學(xué)。然后從基因表達(dá)方面采用實(shí)時(shí)定量PCR的方法研究實(shí)驗(yàn)小鼠肝臟中與脂代謝相關(guān)的五種基因的表達(dá)情況，初步闡述苦丁茶皂苷降血脂的作用機(jī)理。
　　結(jié)論：共分離出6個(gè)化合物分別是：kudinoside A、kudinoside D、kudinoside F、ilekudinoside R、ilekudinoside D、ilekudinoside M，并表征出5

4、2個(gè)皂苷累化合物，為苦丁茶皂苷降脂藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和質(zhì)量控制奠定了基礎(chǔ)。藥效結(jié)果發(fā)現(xiàn)與模型組比較，苦丁茶皂苷治療組小鼠血清中TC、LDL-C、AI均顯著減低，證明苦丁茶皂苷提取物對(duì)高脂血癥有顯著的預(yù)防作用；肝臟組織染色結(jié)果顯示苦丁茶皂苷提取物能改善高脂飼料引起的肝臟脂肪變性；實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明與高脂模型組比較，苦丁茶皂苷提取物能夠顯著上調(diào)高脂血癥小鼠肝臟中的Hmgcr、LDL-R、SR-BI、SR-A和CD36水平，從基因表達(dá)方面初