Notch1信號(hào)通路參與胎盤(pán)血管形成的機(jī)制研究.pdf

1、本文主要從以下幾個(gè)部分展開(kāi)論述：
　　第一部分 缺氧對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)血管形成能力及Notch1信號(hào)通路的影響
　　目的:
　　在常氧及缺氧環(huán)境中，觀察HUVECs的血管生成能力；并檢測(cè)Notch1/Dell4/Jagged1的mRNA及蛋白表達(dá)水平，探討Notch1信號(hào)通路在HUVECs中發(fā)揮的作用。
　　方法:
　　1.在缺氧條件及常氧條件下，利用Matrigei膠血管生成實(shí)驗(yàn)觀察人臍靜

2、脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）的血管形成能力；
　　2.采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR)檢測(cè)缺氧組及對(duì)照組Notch1/Dell4/Jagged1在mRNA水平的表達(dá)情況；
　　3.采用Western Blot法檢測(cè)缺氧組及對(duì)照組Notch1/Dell4/Jagged1在蛋白水平的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　1.缺氧條件下人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞血管生成能力下降，主要表現(xiàn)為斷裂血管增多，血管管腔的完整性下降；
　

3、　2.與對(duì)照組相比，缺氧組Notch1/Dell4/Jagged1 mRNA表達(dá)明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；缺氧12小時(shí)表達(dá)即降至低水平，進(jìn)一步延長(zhǎng)缺氧時(shí)間，表達(dá)量變化不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；
　　3.與對(duì)照組相比，缺氧組Notch1/Dell4/Jagged1蛋白表達(dá)明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；其中，Notch1和Dell4的表達(dá)量隨著缺氧時(shí)間的延長(zhǎng)，逐步降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＜0.

4、05）；而Jagged1的表達(dá)量在缺氧12小時(shí)表達(dá)即降至低水平，進(jìn)一步延長(zhǎng)缺氧時(shí)間，表達(dá)量變化不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）
　　結(jié)論:
　　缺氧可嚴(yán)重影響人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）的血管形成能力，同時(shí)Notch1/Dell4/Jagged1的mRNA及蛋白表達(dá)量均明顯降低，提示Notch1信號(hào)通路可能通過(guò)調(diào)節(jié)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞功能，參與母胎界面血管形成過(guò)程。
　　第二部分 Notch1信號(hào)通路對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（

5、HUVECs）遷移能力的影響
　　目的:
　　探討Notch1信號(hào)通路在HUVECs遷移過(guò)程中發(fā)揮的作用。
　　方法:
　　采用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)，分別給予 Notch1信號(hào)通路抑制劑DAPT及激活劑Jagged類(lèi)似物（JAG-1）干預(yù)后，觀察HUVEC遷移速度的改變。
　　結(jié)果:
　　1.與對(duì)照組相比，給予DAPT干預(yù)后， HUVECs的遷移速度明顯下降；
　　2.與對(duì)照組相比，給予Jagged-1