EGFR敏感突變肺腺癌患者縱膈淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的檢測(cè)與分析.pdf

1、近年來(lái)，肺癌的診療水平取得了顯著的提高，但手術(shù)后5年總生存率仍不到50％。在肺癌各類型中，非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)所占比例高達(dá)80％。精確分期對(duì)于NSCLC患者不僅有利于合理的治療方案制定，還有利于預(yù)后的評(píng)估。目前國(guó)際上通用分肺癌分期系統(tǒng)是TNM分期，而肺癌的TNM分期的關(guān)鍵及挑戰(zhàn)在于對(duì)縱膈淋巴結(jié)(mediastinal lymph nodes MLN)的狀態(tài)的判斷。正電子發(fā)射斷層

2、成像術(shù)(Positron emission tomography，PET)在肺癌的臨床分期中價(jià)值日益突出，可以用于肺部病灶的診斷、MLN分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移灶的發(fā)現(xiàn)以及患者的治療反應(yīng)和預(yù)后的評(píng)價(jià)，還可以指導(dǎo)術(shù)后或根治性放射治療靶區(qū)勾畫(huà)。然而，單純PET不能提供病灶精確的解剖位置，PET/CT融合技術(shù)能完美結(jié)合PET的功能信息和CT的解剖信息，SEN及ACC大大提高，但PET/CT仍存在一部分假陰性和假陽(yáng)性。新近研究表明，差異表達(dá)基因可作為肺癌

3、縱膈淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移生物預(yù)測(cè)因子。因此，本研究第一部分主要探討手術(shù)前PET/CT和增強(qiáng)CT檢查對(duì)肺癌MLN轉(zhuǎn)移的診斷價(jià)值;第二部分先后通過(guò)二代測(cè)序、高內(nèi)涵篩選（high content screening，HCS）篩出肺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)鍵基因。
　　研究目的:1.比較手術(shù)前肺癌患者M(jìn)LN PET/CT及胸部增強(qiáng)CT的影像學(xué)檢查情況與術(shù)后病理診斷，探索PET/CT和增強(qiáng)CT檢查在肺癌MLN轉(zhuǎn)移中診斷效果。
　　2.先后通過(guò)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、

4、生物信息分析、高涵量篩選等方法，檢測(cè)并篩選出肺癌MLN轉(zhuǎn)移密切相關(guān)的關(guān)鍵基因。
　　研究方法:1.收集94例經(jīng)病理確診的肺癌患者的243組縱膈淋巴結(jié)，且手術(shù)前半月內(nèi)行PET/CT和胸部64排增強(qiáng)CT檢查，分別記錄縱膈淋巴結(jié)情況。影像學(xué)陽(yáng)性診斷標(biāo)準(zhǔn):PET/CT SUVmax≥2.5，增強(qiáng)CT:淋巴結(jié)短徑≥10mm或存在液化壞死。金標(biāo)準(zhǔn):術(shù)后縱膈淋巴結(jié)病理結(jié)果，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析使用的是SPSS12.0軟件。
　　2.分別檢測(cè)伴和不

5、伴縱膈淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的EGFR敏感突變肺腺癌臨床標(biāo)本轉(zhuǎn)錄組表達(dá)譜，篩選出差異表達(dá)基因(Differentially expressed genes，DEGs);對(duì)高表達(dá)的差異表達(dá)基因(DEGs)進(jìn)行HCS。
　　研究結(jié)果:1.增強(qiáng)CT與PET/CT診斷肺癌縱膈淋巴結(jié)的準(zhǔn)確度(accuracy，ACC)、敏感度(sensitivity，SEN)、特異度(specificity，SPC)及陽(yáng)性(positive predictive va

6、lue，PPV)和陰性預(yù)測(cè)值(negative predictive value,NPV)分別為80.7％ vs67.5％，P=0.001;79.5％ vs60.3％，P=0.009;81.2％ vs70.9％, P=0.028;66.7％ vs49.5％, P=0.017;89.3％ vs79.1％, P=0.015。
　　2.增強(qiáng)CT與PET/CT融合后糾正錯(cuò)誤病例64例，其中增強(qiáng)CT糾正PET/CT錯(cuò)誤總共有48例，PET/

7、CT糾正增強(qiáng)CT16例誤判。糾正后縱隔淋巴結(jié)診斷準(zhǔn)確度、敏感度、特異度、PPV、NPV分別為87.2％、85.9％、87.9％、77.0％、92.9％。
　　3.糾正后準(zhǔn)確度、敏感度、特異度均明顯高于PET/CT，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但和單純?cè)鰪?qiáng)CT無(wú)顯著性差別。
　　4.ZNF296、N6AMT1、TBCC、DDX49、BCDIN3D等5個(gè)基因影響肺癌pc-9細(xì)胞的增殖。BDH1，DCXR，DDX49，GTF2H5、HYL

8、S1、ISYNA1、TAF8、BCDIN3D、MIA3等9個(gè)基因可能參與pc-9細(xì)胞的轉(zhuǎn)移進(jìn)程。
　　研究結(jié)論:1.增強(qiáng)CT對(duì)肺癌MLN轉(zhuǎn)移的診斷優(yōu)于PET/CT，將PET/CT與增強(qiáng)CT融合可進(jìn)一步明確肺癌有無(wú)MLN轉(zhuǎn)移。
　　2.ZNF296、N6AMT1、TBCC、DDX49、BCDIN3D等5個(gè)基因影響肺腺癌的增殖。BDHl, DCXR, DDX49, GTF2H5、HYLS1、ISYNA1、TAF8、BCDIN3D