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文檔簡介
1、芽孢(spore)是一些桿菌和球菌在惡劣環(huán)境下在其營養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)形成的休眠體。芽孢因其特殊結(jié)構(gòu),特別是核內(nèi)高含量的吡啶二羧酸鈣(Ca2+-DPA)成分,而對熱、輻射、干燥、有毒化學(xué)物質(zhì)具有耐受性和抗性,一旦條件適宜就會萌發(fā)成為營養(yǎng)態(tài)細(xì)胞。研究芽孢萌發(fā)特點,分析理化因子對芽孢萌發(fā)的影響,在抑制和預(yù)防醫(yī)源、食物源芽孢桿菌等方面有著重要意義。
蘇云金桿菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是全球應(yīng)用最為廣泛的生物農(nóng)藥,
2、與一些病原性細(xì)菌具有密切的遺傳關(guān)系,研究其萌發(fā)機(jī)制和影響因素,有助于了解試劑對芽孢的殺滅機(jī)理,提高生物農(nóng)藥使用效率。
本文利用微分干涉差(DIC)顯微成像與拉曼光譜相結(jié)合的方法,動態(tài)監(jiān)測單個Bt芽孢在受到紫外線輻射、NaOH處理、HCl處理后的萌發(fā)過程。
結(jié)果表明:
(1) Bt芽孢對紫外線有較強(qiáng)的抵抗作用。紫外輻射促使Bt芽孢蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,影響最顯著的是萌發(fā)劑受體,其次是DPA釋放通道的相關(guān)蛋
3、白,而對皮層水解酶的影響較小。
(2) NaOH處理并沒有破壞Bt芽孢的內(nèi)膜,蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)變化不明顯,但破壞芽孢萌發(fā)的重要相關(guān)蛋白質(zhì),受損最嚴(yán)重的是皮層水解酶,其次是DPA釋放通道及相關(guān)蛋白。1.0mol/L NaOH處理30~60min后,75%以上的芽孢無法形成新菌落;而50%以上的芽孢能在丙氨酸的觸發(fā)下萌發(fā),但不能在外源CaDPA的觸發(fā)下萌發(fā)。
(3) HCl濃度對芽孢的影響比處理時間長短的影響更大,HCl
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