蘇云金芽孢桿菌（Bt）對中華卵索線蟲的毒力影響研究.pdf

1、中華卵索線蟲(Ovomermis sinensis)作為昆蟲病原索科線蟲中重要的一種，廣泛寄生于農(nóng)、林和衛(wèi)生害蟲體內(nèi)，且寄生率即等于宿主的死亡率，因而具有很高的生防價(jià)值。本文首次較系統(tǒng)地研究了Bt伴胞晶體蛋白、轉(zhuǎn)Bt基因棉和Bt制劑對中華卵索線蟲的直接和間接毒性影響，并初步探討了Bt制劑和中華卵索線蟲進(jìn)行聯(lián)合生物防治的可行性及實(shí)施方法。結(jié)果如下： 1、以不同濃度的10株Bt伴胞晶體蛋白分別作用于中華卵索線蟲受精卵、感染期幼蟲和寄

2、生后期幼蟲等，探討該類Bt蛋白對中華卵索線蟲各發(fā)育期的毒性影響。結(jié)果表明，S1-4 菌株對卵的殺滅毒力最強(qiáng)，其LD<,50>作用24、48和72h時(shí)分別為 0.1503、0.1313和0.0182 μg/ml。而Bt伴胞晶體蛋白對感染期幼蟲和寄生后期幼蟲無明顯致死效應(yīng)，經(jīng)Bt處理的感染期幼蟲對棉鈴蟲(Heliothis armigera)的感染率及平均感染強(qiáng)度與對照組無顯著性差異(p>0.05)，脫出的寄生后期幼蟲能正常蛻皮和交配產(chǎn)卵。

3、將噴灑有Bt蛋白(殺線蟲濃度)的棉花葉片喂食已感染線蟲的棉鈴蟲，線蟲能夠正常發(fā)育并在寄生7～14d 內(nèi)從宿主體內(nèi)脫出。10株Bt菌株經(jīng)ELISA鑒定其 Cry 蛋白表達(dá)類型：7個(gè)菌株(S1-1、S1-4、S3-2、S3-3、S7-1、S7-6和S8-1)同時(shí)表達(dá) crylAc 和 cry5 基因，3個(gè)菌株(S1-8、S2-l和HD-1)只表達(dá)crylAc基因。 2、以表達(dá)CrylAc蛋白的兩種轉(zhuǎn)Bt基因棉飼喂棉鈴蟲，研究其對中華

4、卵索線蟲的寄生情況的影響，結(jié)果表明：用GKl9和新棉33<'8>喂飼的棉鈴蟲幼蟲的生長發(fā)育明顯減慢，且對中華卵索線蟲在宿主體內(nèi)的寄生率影響顯著(p<0.05)，與對照組蘇棉12相比，其寄生率分別下降50.6％和48.7％、平均感染強(qiáng)度分別下降58.1％及51.9％；另外，本研究還發(fā)現(xiàn)寄生在取食Bt棉葉的棉鈴蟲體內(nèi)的寄生期幼蟲雖然感染強(qiáng)度顯著下降(p<0.05)，但發(fā)育成雄蟲的比例卻高達(dá)92.7％(GK19)和94.5％(新棉33<'8>

5、)，而對照組蘇棉12的雄蟲比例僅為20.1％。 3、7種Bt制劑(市售生物農(nóng)藥)在田間推薦濃度下對中華卵索線蟲感染期幼蟲的毒力測定結(jié)果表明，蘇泰和綠茵屬于有害類藥劑，比力、高效Bt/殺蟲單、農(nóng)泰和ABG-6444屬于中度有害類殺線蟲劑，而Bt可濕性粉劑屬于無害類藥劑。7種Bt制劑中，以蘇泰的毒性最高，幼蟲接觸藥液12h，死亡率即達(dá)66.67％，接觸藥液36h后，其累計(jì)死亡率達(dá)81％；其中綠茵、農(nóng)泰、ABG-6444、高效Bt/殺

6、蟲單和比力對感染期幼蟲的毒性，與對照存在顯著差異(p<0.05)；Bt可濕性粉劑的毒性，則與對照無顯著差異(p>0.05)。Bt 可濕性粉劑對中華卵索線蟲感染期幼蟲的亞致死效應(yīng)研究表明，在P、P-Bt 和 Bt-P 處理下，中華卵索線蟲對棉鈴蟲幼蟲的寄生率差異不顯著(p>0.05)，但對棉鈴蟲幼蟲7d內(nèi)的累計(jì)致死率差異顯著(p<0.05)，其中P-Bt處理組對棉鈴蟲的7d內(nèi)的致死率最大，達(dá)96.8％。中華卵索線蟲的感染期幼蟲不能識別感病